有机酸性染料共振散射法测定血红蛋白

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1、桂林理工大学硕士学位论文有机酸性染料共振散射法测定血红蛋白的姓名：凌悦菲申请学位级别：硕士专业：分析化学指导教师：唐宁莉201204桂林理工大学硕士学位论文摘要本文采用共振散射法系统地研究了血红蛋白(Hb，hemoglobin)分别与有机酸性染料：铬天青S、曙红、铝试剂及茜素红的相互作用。探讨了血红蛋白与以上不同染料反应的最佳条件、影响因素，建立了测定血红蛋白的新方法并对实际样品进行了测定。本文的四种方法：操作方便，试样前处理简单，成本低，为血红蛋白的分析测定提供了一些借鉴。本论文全文分为五章。第一章为绪论，介绍了有关血红蛋白分析测

2、定的研究进展，对使用的方法进行了综述，并提出了实验设想。第二章用共振散射法研究了铬天青S与血红蛋白的反应。首先考察了使用不同pH值缓冲溶液的反应情况。在实验中发现，加入pH3．80的Clark-Lubs缓冲溶液后，反应现象明显，并且在378nm处有最大散射值。共振散射强度的增加值△I与血红蛋白浓度在一定范围内(O．04-9．60IIg／mL)呈线性关系，线性回归方程为：A／_-18．36C髓+6．403，相关系数R=O．9967，检出限为0．029IIg／mL。将方法用于人尿液中血红蛋白含量的测定，结果满意。同时进行了离子强度试验和

3、表面活性剂试验，初步研究了反应机理，铬天青S与血红蛋白之间主要以静电引力相结合。第三章用共振散射法研究了曙红与血红蛋白的反应。实验中比较了多种酸性缓冲溶液对反应的效果，使用pH3．20的Clark—Lubs缓冲溶液能有较好的实验现象，并确定了最佳反应条件，探讨了影响因素。在362nm处、血红蛋白浓度在0．16-8．80ug／mL范围内与共振散射强度增值△I呈正比关系，线性回归方程是：AI=14．01C哳-2．193，相关系数R=O．9980，检出限为0．071pg／mL。方法可用于测定人尿液中微量血红蛋白含量。第四章用共振散射法研究

4、了铝试剂与血红蛋白的反应。在pH4．88的醋酸钠一醋酸(NaAc-HAc)缓冲溶液中，铝试剂与血红蛋白发生反应，使体系的共振散射强度增强，最大散射波长位于438nm处，在最佳条件下，测定血红蛋白的线性范围是O．048川．60llg／mL，线性回归方程：△卢18．19C幡_3．956，相关系数R=O．9960，检出限为0．031ug／mr,。将方法用于人尿液中血红蛋白含量的测定，结果满意。第五章运用共振散射法研究了茜素红与血红蛋白的反应。比较了在不同酸性溶液中的反应情况，确定使用稀硫酸溶液为反应介质。在最佳条件下，在最大散射波长520

5、nm处，共振散射强度的增加值△I与血红蛋白浓度在0．05-14．00llg／mL间呈正比关系，线性回归方程是：AI=23．1lC髓-4．550，相关系数R=0．9981，检出限为0．013uglmL。方法用于经前处理后人尿液中血红蛋白含量的测定，结果满意。‘关键词：有机酸性染料，血红蛋白，共振散射桂林理工大学硕士学位论文AbstractThereactionsbetweenhemoOobin(Hb)andsomeacidicorganicdyeswerestudiedbyResonanceRayleighscattering(R_R

6、S)inthispaper．Theoptimumsandaffectionfactorswereinvestigated．n把dyes：aluminon,eosin，cllromeazurols(CAS)，andalizarinredcanbeseparateusedinanalysisofconcentrationofHb．11圮fourmethodsofdeterminationofHbwereestablished．n屺resultsofanalysis、^，i廿lsamplestakenfromhealthypeopleur

7、ineweresatisfactory．111emethodsarelow-cost，andtheoperationisconvenientafterthesimplepretreatment．nemethodscouldprovidesomereferencesforresearchonthestudyofHb．Thereistheprolegomenoninchapter1．11圮researchingprogressondeterminationofHbandtheappliedmethodsweresummeried．The

8、n,theresearchproposalforthisdissertationwaspresented．Inchapter2，thereactionofHb、析tllCASWasstudiedbyRRS．HborCASc觚onlyp