广西猪源沙门氏菌的分离鉴定及其生物学特性的研究

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1、广西大学硕士学位论文广西猪源沙门氏菌的分离鉴定及其生物学特性的研究姓名：黄福标申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：黄伟坚20120628广西猪源沙门氏菌的分离鉴定及其生物学特性的研究摘要沙门氏菌(Salmonella)是兽医和医学临床上最常见的一类食源性人畜共患致病菌，对畜禽养殖业的发展和人类的健康造成了极大的危害。在集约化养猪生产的过程中，为了防治猪病和促进猪的生长，抗菌药物被广泛的使用，导致沙门氏菌的耐药性问题日益突出。生猪是沙门氏菌的重要贮藏宿主，沙门氏菌可通过其进行传播，进而对食品造成污染，危害公共卫生。本研究从广西区某屠宰厂的生猪和南宁、贵港、柳州三个地区规

2、模化猪场的临床健康猪共采集样品235份，经细菌分离纯化、生化试验、血清学试验、PCR鉴定和致病性试验等，共获得39株沙门氏菌，检出率为16．6％(39／235)。其中从南宁市某生猪屠宰场屠宰猪的肠道采集样品131份，分离到沙门氏菌35株。在被调查的三个猪场中，南宁地区猪场采集新鲜猪粪样品44份，分离到沙门氏菌l株，检出率为2．3％(1／44)；贵港地区猪场采集新鲜猪粪样品30份，分离到沙门氏菌1株，检出率为3．3％(1／30)；柳州地区猪场采集新鲜猪粪样品30份，分离到沙门氏菌2株，检出率为6．6％(2／30)。39株沙门氏菌分离株分属4个血清群：B群19株，．其中的11株为

3、德尔卑沙门氏菌；C1群1株，为里森堡沙门氏菌；C2群1株；E1群8株；剩下的8株属于A，吓群。39株沙门氏菌中有33株对小白鼠具有致病性，致病率高达84．62％(33／39)。致病性高的有26株，死亡率为100％(3／3)，其余依次5株，死亡率为66．67％(2／3)；2株死亡率为33．33％(1／3)。对31种抗生素的感受性试验中，39株沙门氏菌对青霉素G、新生霉素、苯唑西林的耐药率最高，分别为100％、94．9％、94．9％。耐5种以上抗生素的多重耐药菌株达至tJl00％(39／39)，最常见的多重耐药谱为PEN．OXA．NOV-Ⅵ埘．n仰，占分离菌株的84．62％(33

4、／39)。表明广西区不同猪群临床健康猪不同程度携带有沙门氏菌，分离T菌株耐药性严重，多重耐药率极高。对39株广西沙门氏菌分离株，运用Touch．downPCR扩增7种毒力基因(invA、hilA、sipA、sopA、sopB、sopD、sopE2)，I、II、ⅡI类整合子及27种耐药基因：喹诺酮类耐药基因(qnrA、qnrB、qnrS、aac(6’)一Ib)，超广谱p一内酰胺酶类耐药基因(TEM、SHV、OXA、blaTEM、blaPSE)、氨基糖苷类耐药基[](aadAl、aadA2、aadB、aph(3’)一IIa、aacC2、aac(3’)-IIa、strA、strB)

5、、磺胺类耐药基因(sull、sul2、sul3)、氯霉素类耐药基因(Catl、Cat2、CmlA、Flor)、四环素类耐药基因(tetA、tetB、tetG)。结果表明，39株沙门氏菌7种毒力基因invA、hilA、sipA：,sopA、sopB、sopD、sopE2的检出率分别为100％、87．18％、84．62％、5．13％、66．67％、48．72％、35．9％。I类整合子检出率为46．15％(18／39)其中可变区检出率为7．9％(3／39)。对沙门氏菌进行27种耐药基因的检测，共检测出21种耐药基因。所检测的耐药基因tetA、sul2、qnrB较为普遍，检出率分别为

6、69．23％、69．23％、56．41％；耐药基因Flor、tetG、TEM、blaTEM、aadA2、strB、sull、qnrS、strA、Sul3、OXA、aph(3’)一IIa、tetB、aac(6’)一Ib、cmlA、aac(3)一IIa、aacC2、aadAl、的检出率分别为46．15％、41．03％、38．46％、38．46％、38．46％、35．90％、35．90％、28．21％、28．21％、28．21％、25．64％、25．64％、25．64％、23．08％、20．51％、12．82％、7．69％、5．13％，未能检NNCatl、Cat2、qnrA、SHV

7、、blaPSE、aadB基因。关键词：沙门氏茵，血清群，多重耐药，毒力基因，整合子，耐药基因，Touch-downPCRIIISOLATEDANDSTUDIEDOFV舢RIETY0FBIOLOGICALCHARACTERISTICS0FSALMO仑丁ELLAFROMPIGSINGUANGⅪABSTRACTSalmonellaisoneofthemostcommonfood—bornezoonoticpathogensinveterinaryandmedicalclinical，resultinginag