多酚-壳聚糖微粒的制备及性能研究

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1、分类号：密级：UDC：编号：河北工业大学硕士学位论文多酚-壳聚糖微粒的制备及性能研究论文作者：蒋悦颖学生类别：全日制学科门类：工学学科专业：生物化工指导教师：荆迎军职称：教授资助基金项目：河北省自然科学基金资助（项目编号：B2016202111）DissertationSubmittedtoHebeiUniversityofTechnologyforTheMasterDegreeofBiochemicalEngineeringPREPARATIONANDPROPERTIESOFPOLYPHENOLS-CHITOSANMICROPARTICLESbyJian

2、gYueyingSupervisor:Prof.JingYingjunApril2017ThisworkwassupportedbytheNaturalScienceFoundationofHebeiProvince(No.B2016202111).摘要壳聚糖微粒是包封和缓释多酚物质的最佳载体之一，它不仅可以提高多酚物质的稳定性还可以增强其生物利用率。本研究选择了多酚物质中最具有代表性的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和原花青素作为研究对象，制备了EGCG-壳聚糖微粒(EGCG-CS-MP)和原花青素-壳聚糖微粒(PC-CS-MP)，将二者统称为多酚-

3、壳聚糖微粒，并对其生物活性进行了研究。首先，利用离子交联法制备多酚-壳聚糖微粒，通过单因素和正交试验优化了工艺条件，并研究了其体外释放性能。经优化后EGCG-CS-MP的包封率为68.4%，载药量为81.92mg/g；PC-CS-MP的包封率为70.5%，载药量为78.33mg/g。通过显微镜观察可知多酚-壳聚糖微粒的形貌为规则的球形，分散性较好，无团聚或粘连现象，平均粒径为60μm。由傅里叶红外光谱测定可知，壳聚糖分子的氨基基团参与了离子交联反应。EGCG-CS-MP和PC-CS-MP的体外释放行为分别在5h和7h左右完成；低pH环境更易于多酚的释放；E

4、GCG-CS-MP和PC-CS-MP释放的最适温度分别是37℃和42℃；盐离子浓度可以调节多酚-壳聚糖微粒的释放行为。多酚-壳聚糖微粒在人工胃液中比人工肠液中更易释放。接着，研究了多酚-壳聚糖微粒的抗氧化活性。结果表明EGCG-CS-MP和PC-CS-MP均具有很强的自由基清除活性和还原力，其中EGCG-CS-MP对DPPH自由基的清除率可达94.3%，PC-CS-MP对羟基自由基清除率在80%以上。然后，分析了多酚-壳聚糖微粒的抑菌活性。多酚-壳聚糖微粒对金黄色葡萄球菌、溶壁微球菌、普通变形杆菌和铜绿假单胞菌有很好的抑制作用，但对大肠埃希菌、乳酸杆菌和粪

5、肠球菌的生长没有影响。最后，评价了多酚-壳聚糖微粒对BALB/c小鼠免疫功能的影响。在本研究剂量范围内多酚-壳聚糖微粒对小鼠的正常生长和主要器官的质量没有影响。多酚-壳聚糖微粒能显著提高脾脏T淋巴细胞增殖能力，说明多酚-壳聚糖微粒对小鼠的免疫活性具有一定的增强作用。关键词：壳聚糖表没食子儿茶素没食子酸酯原花青素微粒生物活性IIIABSTRACTChitosanmicroparticles,oneofthemostpromisingmaterialsfortheencapsulationanddeliveryofpolyphenols,canimprovet

6、hechemicalstabilityandbioavailabilityofpolyphenols.Epigallocatechin-3-gallate(EGCG)andprocyanidinarethemostrepresentativecompoundsofpolyphenols.Inthisstudy,EGCG-chitosanmicroparticles(EGCG-CS-MP)andprocyanidin-chitosanmicroparticles(PC-CS-MP)wereprepared.Bothofthemwerecollectively

7、calledpolyphenols-chitosanmicroparticles,andtheirbiologicalactivitieswerestudied.Firstly,polyphenols-chitosanmicroparticleswerepreparedusingioniccrosslinking.Thepreparationconditionswereoptimizedbyone-factor-at-a-timemethodandorthogonaldesign,andtheinvitroreleasebehaviorofpolyphen

8、ols-chitosanmicroparticleswasstud