养殖花鳗鲡与太平洋双色鳗鲡主要病原菌的研究

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1、学校编码10390分类号S943学号2010219009密级硕士学位论文养殖花鳗鲡与太平洋双色鳗鲡主要病原菌的研究指导教师：关瑞章教授作者姓名：杨方园申请学位级别：硕士专业名称：水产养殖论文提交日期：2013年5月10日论文答辩日期：2013年6月4日学位授予单位：集美大学学位授予日期：2013年6月答辩委员会主席：王桂忠教授论文评阅人：王桂忠教授周宸教授级高工纪荣兴教授硕士学位论文养殖花鳗鲡与太平洋双色鳗鲡主要病原菌的研究StudiesonthemainpathogenicbacteriafromcultivatedAnguillamarmorataand

2、A.bicolorpacifica学科门类：农学作者姓名：杨方园指导教师：关瑞章教授专业名称：水产养殖学位授予单位：集美大学论文答辩日期：2013年6月4日杨方集园美大集学硕美士大学位学论硕文士学养殖位花论鳗鲡文与太平洋双养色殖鳗花鲡鳗主鲡要与病太原平菌洋的双研色究鳗鲡主要病原菌的研究杨杨方方园园学术诚信声明兹呈交的学位论文，是本人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究成果。除文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。本人依法享有和承担由此论文产生的权利和责任。声明人（签名）：时间：保护知识产权声明本人完全了解

3、集美大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意集美大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。作者（签名）：导师（签名）：时间：养殖花鳗鲡与太平洋双色鳗鲡主要病原菌的研究摘要本文主要研究了养殖花鳗鲡与太平洋双色鳗鲡的病原菌。通过在不同季节采集病鳗并从鳃、肝脏等病灶分离菌株，应用本实验室自主开发的30株病原菌血清试剂盒进行检测，对未能检出的菌株，依据菌体形态、常规生理生化鉴定及Biolog系统进行鉴定。对新分离菌株进行人工感染试

4、验，同时研究了五倍子、大黄、石榴皮等10味中药对新分离菌株的体外抑菌效果。主要结果如下：1.在不同季节采集病鳗并从病灶处分离菌株，应用血清试剂盒进行检测，对未能检出的菌株进行鉴定。结果显示：能被血清试剂盒检出的花鳗鲡病鳗共120尾，检测到致病菌15株（B06、B08、B09、B10、B11、B16、B18、B19、B20、B21、B26、B27、B30、B32、B43）；未能检出的花鳗鲡病鳗共52尾，分离纯化得到29株菌，筛选后经生化鉴定为9株菌，包括嗜水气单胞菌、鲍氏不动杆菌、嗜水气单胞菌DNA组1型、弗氏柠檬酸杆菌、迟钝爱德华氏菌各1株，兽生气单胞菌和门

5、多萨假单胞菌各2株。能被血清试剂盒检出的太平洋双色鳗鲡病鳗共86尾，检测到致病菌15株（B04、B05、B06、B08、B10、B11、B12、B14、B18、B19、B21、B26、B27、B31、B32）；未能检出的太平洋双色鳗鲡病鳗共34尾，分离纯化得到12株菌，筛选后经生化鉴定为4株菌，包括嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌1群、类志贺邻单胞菌及豚鼠气单胞菌各1株。2.挑选新分离菌株进行人工感染试验，从中选取毒性较强的菌株测定其对鳗鲡的半致死浓度（LD50）。结果显示：9株菌有5株（嗜水气单胞菌、嗜水气单胞菌DNA组1型、兽生气单胞菌、门多萨假单胞菌及弗氏

6、柠檬酸杆菌）对健康花鳗鲡有明显的致病性，其LD506666分别为3.16×10CFU/mL、2.15×10CFU/mL、2.15×10CFU/mL、4.64×10CFU/mL及73.2×10CFU/mL。4株菌（嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌1群、类志贺邻单胞菌及豚鼠7气单胞菌）对太平洋双色鳗鲡均有明显的致病性，其LD50分别为1.47×10CFU/mL、6761.78×10CFU/mL、3.52×10CFU/mL及3.98×10CFU/mL。3.从规格及季节两方面对养殖花鳗鲡与太平洋双色鳗鲡主要病原菌的种类以及流行规律进行研究，结合血清试剂盒检测与人工感染试

7、验结果表明：花鳗鲡共检测161尾，检测到致病菌20株，其中B26在五种规格的花鳗鲡中均能检测到，B19、B21等6株菌在三个季节中也均能够检出；太平洋双色鳗鲡共检测了112尾，检测到病原菌19株，其中B26在五种规格的太平洋双色鳗鲡中均能检测到，B18、B32等5株菌在三个季节中也均能够检出。4.挑选五倍子、大黄、石榴皮等10味中药，在体外测定其单用、双联用以及三联用对8株新分离的养殖花鳗鲡以及太平洋双色鳗鲡病原菌的抑菌效果。结果显示：10味中药对8株病原菌均具有较好的抑菌效果，平均MIC范围为1.69-13.14mg/mL；挑选单用药效I较好的5种中药而设

8、计10种双联用复方进行试验，试验结果表明双联用复方的