大鼠间充质干细胞对小鼠黑色素瘤影响的实验研究

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2、已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：z卜球硫导师签章：<丁幽赢砌l≥年弓月谚日目录朋J圳』棚l舢删』Ⅲ舢J删删删Y2337274中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文大鼠间充质干细胞对小鼠黑色素瘤影响的实验研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8日【『舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯芍材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l3附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l5附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26综述间充质干细胞目前在临床中的研究进展30致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4l中文摘要大鼠间充质千细胞对小鼠黑色素瘤影响的实验研究摘要目的：恶性黑色素瘤(malignantm

4、elanoma,MM)来源于黑色素细胞，是一种恶性程度较高的具有黑色素细胞分化的恶性肿瘤，占所有恶性肿瘤的1％～2％，大部分发生于皮肤n乏3，其次为直肠、肛门、生殖道、消化道、鼻窦、喉、肺等，也可发生于脉络膜及软脑膜处b巧]。恶性黑色素瘤占皮肤肿瘤的7％--一20％，近年来其发生率呈明显增高趋势。与黑色素瘤发生的相关因素有遗传、紫外线、色素痣等。因恶性黑色素瘤病理组织学和细胞学形态的多样性，部分肿瘤不含黑色素，容易误诊和漏珍。目前的治疗方法常采用手术、生物、放疗及化疗，但效果不甚理想。因此寻求疗效好、副作用小的治疗方法是当下研究的热点问题。间充质干细胞(m

5、esenchymalstemcells，MSCs)最早从骨髓中分离发现的，具有塑料贴壁性，呈纤维状，能够在体内外分化为脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞，也可向其它生殖系统分化。由于MSCs具有多潜能的分化特性，最早是用来修复组织。近年来研究表明，它还具有抗增殖和抗炎症的作用，同时还具有很好的迁移能力和肿瘤趋向性。在肿瘤生长的微环境中，肿瘤细胞及其周围的纤维基质可分泌各种细胞因子，能促进MSCs向肿瘤部位迁移集聚、增殖分化，进而影响肿瘤的生长。因此，关注和研究MSCs对肿瘤微环境的影响，MSCs用于临床抗肿瘤治疗研究方面有着重要的作用。方法：1用密度梯度离心法分

6、离并纯化大鼠的骨髓间充质干细胞，并且将MSCs细胞培养于含10％胎牛血清的DMEM培养基(含青霉素lOOU／ml，含链霉素lOOU／ml，PH7．2)中，放入37"C、5％C02的培养箱内进行常规传代培养。2通过诱导，让所得到的间充质干细胞通过向成骨细胞和神经元样细胞分化，来验证其作为干细胞具有多向分化的潜能。3将B16恶性黑色素瘤细胞培养于含10％胎牛血清的DMEM培养基(含青霉素100U／ml，含链霉素100U／ml，PH7．2)中，放入37。C、5％C02的培养箱内进行常规传代培养。中文摘要4黑色素瘤动物模型的制备：将小鼠黑色素瘤细胞B16向小鼠后肢

7、皮下注射，制备黑色素瘤动物模型。5动物模型制备完成后，随机将小鼠分为A(对照组)、B(实验组)两组，每组6只。6动物实验A组小鼠注射生理盐水，B组小鼠注射间充质干细胞。让小鼠自由进食水，观察并记录肿瘤的生长情况。7间充质干细胞移植两周后将小鼠全部处死，取下A、B两组小鼠的肿瘤，做常规组织病理检查。8统计学分析运用统计学软件SPSS对数据进行统计分析。结果：l以密度梯度离心法分离纯化的细胞，可逐步得到呈长梭形放射状排列的细胞。2通过诱导，所得到的间充质干细胞可以向成骨细胞以及神经元样细胞分化。3经皮下注射小鼠黑色素瘤细胞B16的小鼠，1周后成瘤，2周时肿瘤明

8、显增大，小鼠活力正常。4间充质干细胞移植两周后，小鼠活力正常，并将