啤酒酵母中核苷酸的提取研究new

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第31卷第3期酿酒Vo1．31，No．32004年5月LIQUORMAKINGMav．2(x】4文章编号：1002-一8110{2004)03—003003啤酒酵母中核苷酸的提取研究苏庆辉，吴晓丹，马兴胜，王长宇(1黑龙江商业大学．哈尔滨150076；2黑坨汀F缘麦、Ji限公rj．哈尔滨150076；3黑坨江省轻工科学研究院哈尔滨150001j摘要：对压榨啤酒酵母粉进行处理，采用盐热法提取核酸液，利用5’一磷酸二酯酶把核酸分解为4种核苷酸，按核苷酸的不同特性，用树脂对其进行分离，使4种核苷酸都能得到较好的分离：关键词：核

2、苷酸；AMP；树脂；分离中图分类号：TS262．5：I61．9文献标识码：A0引言UV—I20型紫外分光光度计岛津5’一腺嘌呤核苷酸(5’一AMP)义称腺苷酸或腺竹一一磷电热恒温r燥箱启东电器二厂酸，是生物体细胞核糖核酸的组成成分之一，是能量传递物pt1S一25型酸度计上海伟业仪器厂ALC一2104电子天平北京赛多利斯天平有限公司质，具有显著的扩张末梢血管和降压作用临床用于播敝悱80—2离心机上海浦东物理光学仪器厂硬化症、肝病、静脉曲张性溃疡并发症。用以腺苷酸成分为LX．1—64OO离、饥北京医疗仪器修理厂主的复合物制成滴眼剂，可治疗眼疲劳、中心视网膜炎、角膜sllB

3、一Ⅲ循环水式多用真空泵郑州长城科工贸有限公司翳等疾病。在医药工业上，用于生产ATPCoA、Co1．3’，5’一万能高速粉碎机天津泰斯特一80型。环腺苷酸和阿糖腺苷等的重要原料。5’一腺嘌呤核箭酸呵HI一2S恒流泵上海泸西分析仪器厂以用碱或酶水解核糖核酸制得。用5’一磷酸二酯酶降解陔SIkSZIO0数控计滴自动部份收集器上海泸西分析仪器厂糖核酸，得到四个5’一单核苷酸。核苷酸是一类在代埘{=做liD一93—1型核酸蛋白检测仪上海金达生化仪器厂为重要的生化物质，它L乎参与细胞的所有生化过程¨。陔XWF—S小型台式记录仪上海自动化仪表三厂苷酸是由碱基、戊糖与磷酸组成，核糖核

4、酸是由成千上万1＼R一201旋转蒸发器上海申胜生物技术有限公司四种不同的核苷酸互相联接而成的高分子聚合物。核搪核DF一102集热式磁力加热搅拌器北京制药工业研究所酸用5’一磷酸二酯酶催化水解，控制反应条件，可选择地挟W一201B恒温水浴锅上海申胜生物技术有限公司得5’一鸟苷酸(5’一GMP)、5’一腺苷酸(5’一AMP)、5’一胞竹8O一2离心机上海浦东物理光学仪器厂酸(5’一CMP)、5’一尿苷酸(5’一UMP)l’J，其中5’一GMP5’一AMP的脱氨产物5’一肌苷酸(5’一IMP)因具有特殊的化1．2核酸液的提取压榨啤酒酵母粉(10％)加食盐(盐浓度15，5％)

5、、水，高学结构一磷酸与戊糖的5’位碳原子形成酯键，其碱基为6位温抽提(94℃)6h一冷却4℃一离心一上清液(核酸液)碳原子上具有羟基的嘌呤碱而呈鲜味。。核苷酸用处很广，1．35’一磷酸二酯酶粗酶液的提取最主要用途之一是作食品助鲜卉lJ。麦芽根一粉碎一过100目筛一提取一过滤一离心分离l实验部分l，l实验材料与仪器一抽滤液一灭杂酶一粗酶液。在抽滤液中含有多种核苷酸类物质的降解酶，需利用它们性质的差异，进行纯化。本实1．1．1实验材料验中利川陔苷酸降解酶对热的敏感程度不同进行提取。加压榨啤酒酵母粉哈尔滨啤酒厂入ZrI2+可提高5’一磷酸二酯酶的耐热性。而其它核苷酸食盐市售

6、盐酸(AR)哈尔滨市新薛花工厂降解酶足不耐热的，用温度67℃，时间15min的热处理。通氢氧化钠(AR)天津市河北区红星化工包装厂过这种热处理，可以使不耐热的酶失活，然后可获得相对纯麦芽根哈尔滨啤酒，’化的5’一磷酸二酯酶。聚醚砜超滤膜中国科学院上海研究所．1．4核酸溶液含量的测定t4截留相对分量2r雏=t~g／mLAMP广东江门制约r(纯度95％)1．55’一磷酸二酯酶活力的测定2实验仪器5’一磷酸二酯酶活力的测定：紫外分光光度计法_5酶液活力(单位／rnIJ)=害△0·Dxaxl33．3收稿日期：2004—02～16一酶液测定活力前预先稀释的倍数。作者简介：苏庆辉

7、(1974一)，男，黑龙汀省人，硕十1．6核酸降解维普资讯http://www.cqvip.com第3期苏庆辉，等：啤酒酵母中核苷酸的提取研究·3l·核酸的浓J蔓为2％，升黼至68：，将t)HffI州5l～53，在核酸溶液中加I入预处的卡fl脯液。坝处33I。{：}RNA约加酶4(DOU继续升温至70~C．搅拌，i70I：～75之川，保持2h，许流加碱液将lHff【制5．1—53之间，『自j断搅拌。酶解结束后，迅速l丁}至，·lOmi．，(=)终止酶反嘘，使蛋白质沉淀，迅述冷区至常温l6麟液川20千的超滤膜超滤，除杂蛋白。1．7树脂分离核苷酸91、7