聚乳酸-骨基质明胶多孔复合材料制备及骨诱导活性研究

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1、中国修复重建外科杂志2007年2月第21卷第2期·135·聚乳酸2骨基质明胶多孔复合材料制备及骨诱导活性研究1232241张育敏李宝兴李冀马绍英赵亚平王建茹原林【摘要】目的采用CO2超临界法制备一种新型的具有生物活性的聚乳酸(polylacticacid,PLA)2骨基质明胶(bonematrixgelatin,BMG)多孔复合型骨支架材料,并检测骨诱导活性。方法选取健康成人供体皮质骨进行脱脂、脱钙和脱蛋白处理制备BMG,将按体积比3∶1混合的BMG2PLA及纯PLA,分别置入超临界CO2反应装置中,同时

2、加入粒径为100~200Lm的NaCl颗粒作为制孔剂,反应制备多孔PLA2BMG和PLA复合材料。在含10%胎牛血清的DMEM6高糖培养基中培养MC3T32E1成骨前体细胞,按20Llö孔2×10öml浓度的细胞悬液加入含不同材料的24孔培养板内共培养2周,其中PLA2BMG组:每孔含100Lg粉碎的PLA2BMG复合材料;PLA组:每孔含100Lg粉碎的PLA材料;DMEM高糖培养基组作为对照组;每组设6个复孔。通过茜素红S染色法染色钙化结节,定量分析钙化面积;收集共培养细胞并在1ml0.2%的Noni

3、detP240溶液中超声裂解,检测细胞内钙含量和ALP活性。结果超临界CO2法所制备PLA2BMG多孔复合材料中BMG与PLA混合均匀,孔隙大小为50~150Lm,孔径联通性好;PLA2BMG组ALP活性、钙含量及钙化面积均值分别为325159±70140Uögprot、3151±1164mmolögprot和42198%±4144%,均高于PLA组63162±30101Uögprot、1104±0121mmolögprot和9155%±1194%,及对照组2140±1147Uögprot、0170±01

4、24mmolögprot和0186%±0141%,比较差异均有统计学意义(P<0105),且PLA组的ALP活性及钙化结节面积与对照组也有统计学意义(P<0105)。结论采用CO2超临界法制备的PLA2BMG多孔复合支架材料具有良好的骨诱导活性,有可能作为一种有前景的骨植入材料及骨组织工程支架材料。【关键词】组织工程骨基质明胶聚乳酸骨诱导中图分类号:R329.2R318文献标识码:AFABRICATIONOFPOROUSPOLYLACTICACID-BONEMATRIXGELATINCOMPOSITEBI

5、OACTIVEMATERIALANDITSOSTEOINDUCTIVEACTIVITYöZHANGYumin,LIBaoxing,LIJi,etal.ResearchCenterofTissueEngineering,SouthernMedicalUniversity,GuangzhouGuangdong,510515,P.R.China.E2mail:zymsir@sina.comCorrespondingauthor:ZHANGYumin,E2mail:zymsir@sina.com【Abstract

6、】ObjectiveTofabricateanovelporousbioactivecompositebiomaterialconsistingofpolylacticacid(PLA)2bonematrixgelatin(BMG)byusingthesupercriticalcarbondioxidefluidtechnique(SC2CO2)andtoevaluateitsosteoinductiveactivity.MethodsThecorticalbonesselectedfromhealthy

7、adultdonorswereprocessedintoBMGbythedefatting,demineralizing,anddeproteinizingprocesses.PLAandBMGweremixedatavolumeradioof3∶1;then,thePLA2BMGmixedmaterialandthepurePLAmaterialwererespectivelyplacedinthesupercriticalcarbondioxidereactionkettles,andwereresp

8、ectivelyaddedbytheNaClparticles1002200LmindiameterfortheporosityofthematerialssothattheporousPLA2BMGcompositematerialandtheporousPLAcompositematerialcouldbeformed.Themouseosteoblast2likeMC3T32E1cellswereculturedinth

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