睾酮对人外周血内皮祖细胞增殖和迁移能力的影响及机制探讨

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1、分类号墅垒!：垒UDC鱼!鱼密级公珏编号!Q2窆窆曼!Q13Q12JIANGSUUNIVERSlTY硕士．学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：墨酮挝厶处围鱼内应担细胞增殖独迂整篚力的髭响厦扭制拯过学科专业：．内：型堂作者姓名：蘸亚威指导教师：任：国麽答辩日期：2Q!量二Q鱼二Q2独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡

2、献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：该亚藏劢I弓年；月f7日学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论文全文数据库》并向社会提供查询，授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。论

3、文的公布(包括刊登)授权江苏大学研究生处办理。本学位论文属于不保密⋯一躲膂砻威⋯一抄砰hJ弓年6月l7日Ⅻl弓年占月f7日江苏大学硕士学位论文目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1ABSTRACT．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3中英文对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．5第一章引言．．．．．．．．。．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．⋯．．．．．．．⋯．．．．．7第二章材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．

4、⋯．．．．．．⋯．．．．．101．试验仪器与试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1O2．EPCs体外培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯143．EPCs的鉴定⋯．⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯164．实验分组⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．175．实验指标的检测⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯186．统计学方法⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21第三章结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．⋯．．．．．．221．EPCs的鉴定结果⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．222．睾酮对EPCs

5、的影响⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯．．243．雄激素受体和P13K／Akt通路对睾酮介导的EPCs功能的影响⋯⋯⋯27第四章讨论．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31第五章主要结论与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．371．主要结论：⋯⋯．⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．372．展望．⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．37第六章参考文献．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．38文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45攻读研究生期间发表的论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．

6、58致谢⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．59江苏大学硕士学位论文江苏大学硕士学位论文摘要目的观察睾酮(testosterone，T)对体外培养的人外周血内皮祖细胞(pe邱heral—blood—derivedendothelialprogenitorcells，PB—EPCs)增殖和迁移能力的影响，并探讨其可能机制。旨在通过探讨雄激素对内皮祖细胞成血管能力的影响，研究雄激素在保护男性心血管系统中的可能机制。方法(1)外周血EPCs的分离、培养和鉴定：取健康男性志愿者外周血(每份20mL，肝素抗凝)，采用密度梯度离心法获得单个核细胞(Mononucle

7、arcells，MNCs)，经EGM．2MV培养基重悬、计数2—5×106／ml接种至已用人纤维连接蛋白包被的培养板中，于(370C、5％C02、饱和湿度)培养箱中孵育。培养至第7天，取贴壁细胞进行鉴定：①倒置显微镜下观察细胞形态，并摄片②多波长激光共聚焦显微镜观察FITC标记的荆豆凝集素(FITC．UEA．I)和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI．ac．LDL)双染色阳性为正在分化的EPCs(查)流式细胞仪检测其表面标志CDl33、VEGFR-2、CD34、CDl4的表达。(2)实验分为六组：第1、2、3、4组分别加入0、1、10、100nmol／L睾酮；

8、第5组加入10nmol／