细菌脂多糖联合高浓度氧对新生大鼠脑发育的影响

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheAssociatedEffectsofBacterialLipopolysaccharideandNormobariHyperoxiaonBrainDevelopmentofNeonatalRatByJiajiaDuanSupervisor：Prof．FalinXuPaediatricsTheThirdAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay,20132学位论文原创性声明本人郑重声明：所

2、呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。糊姗：弛协嗍肿易㈣学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩

3、印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑少W,l：k学。保密论文在解密后应遵守此规定。粼姗：礼骱慨加f弓年6M34摘要细菌脂多糖联合高浓度氧对新生大鼠脑发育的影响硕士研究生：段佳佳导师：徐发林副教授专业：儿科学郑州大学第三临床学院河南郑州450052摘要呼吸和感染问题是新生儿管理的重要内容，也是近年来新生儿领域研究的热点。呼吸问题是危重新生儿监护的首要问题，低氧血症是新生儿疾病中常见的危重症之一，严重时可危及患儿生命。氧疗是治疗低氧血症常用且有效的方法，有

4、时需要应用机械通气改善患儿的通气和换气功能；但是氧气却是一把双刃剑，在氧疗的过程中不可避免的发生氧分压的波动，近年来高氧血症越来越引起人们的关注。由高浓度氧导致的早产儿支气管肺发育不良、肺损伤、视网膜病变等均已在动物实验及临床研究中得到证实，近年来有研究显示高氧可影响未成熟脑的发育，导致神经细胞凋亡和脑白质损伤。感染性疾病是新生儿期重要疾病之一，也是引起新生儿死亡的主要原因。新生儿，尤其是早产儿，由于免疫系统发育尚未成熟，抵抗力低下等原因易发生感染性疾病。近年来随着对感染性疾病认识的深入，预防措施的改善，虽然发病率有逐年下降趋势，但目前感染性疾病的

5、发生率及病死率在我国仍居新生儿疾病的首位，感染可导致早产儿众多组织器官的损伤。国内外众多研究显示感染／炎症反应可导致早产及早产儿脑损伤的发生。在临床上高氧及感染二者同时存在的情况并不少见，如肺炎、新生儿败血症等严重感染合并呼吸衰竭，需要呼吸支持等情况，于是感染与高氧联合存在的问题引起了我们的关注。目的研究表明高氧及感染均可导致新生儿脑损伤，而关于两者联合作用对新生儿未成熟脑发育的影响，目前报道尚少。本论文旨在通过动物实验探讨高氧、细菌脂多糖(LPS)单独作用及联合作用对新生大鼠脑发育的影响及其相关机制。I摘要材料与方法2日龄(P2)新生SD大鼠12

6、0只随机分为4组：LPS组、高氧组、LPS+高氧组、对照组，分别观察各组大鼠的一般情况，记录其每日体重。LPS组每天腹腔注射LPS(O．6mgKg)，同时置于同一室内空气中，氧浓度21％，连续处理5天至7日龄(P7)；高氧组与母鼠一起置于自制氧箱中，每天腹腔注射等容积的生理盐水(99·L。1)，维持箱内氧浓度在(80士2)‰连续5天至P7；LPs+高氧组每天腹腔注射LPS(0．6mg／K曲，同时维持箱内氧浓度在(80-a：2)％，至P7；对照组每天腹腔注射等容积的生理盐水(99·LJ)，置于同一室内空气中，氧浓度为21％，至P7。各组大鼠饲养至P7

7、时，每组取10只灌注取脑，石蜡固定，采用免疫组织化学法检测各组大鼠脑组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(C唧ase．3)、核转录因子P65(NF．r．BP65)的表达情况；每组另取lO只，将脑组织匀浆后采用ELISA法检测各组大鼠脑组织中白介素．6(IL．6)、8．异．前列腺素F2a(8．iso．PGF2a)的表达水平；各组剩余10只大鼠饲养至P12时，应用免疫组织化学法检测各组大鼠脑组织碱性髓鞘蛋白(MBP)的表达。勿士甲皇口术1．P7时四组新生大鼠脑组织中Caspase．3及NF．1(BP65表达水平是一致的，从高到低依次为LPS+高氧组、LPS组

8、及高氧组、对照组。对照组、LPS组、高氧组、LPS+高氧组脑组织Caspase．3阳性表达的细胞数分别为：6．80a：1．