离体筛选小麦抗赤霉病和根腐病突变体＊ i.小麦兼抗赤霉病和根腐病愈伤组织的筛选及其抗病性的鉴

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1、jftf}HEREDITAS(憋jing)14．(3):.4-6.二.=1.,丝2离体筛选小麦抗赤霉病和根腐病突变体＊I．小麦兼抗赤霉病和根腐病愈伤组织的筛选及其抗病性的鉴定郭丽娟姚庆筱胡启德（中国科学院遗传研究所，北京，100101张浩康绍兰邓福友董金皋黄梧芳（河北农业大学，保定，071001)本文选用冬小麦和春小麦品种及其杂种后代的幼穗进行离体培养，以赤霉病菌及根腐病菌的培养滤液为选择剂，按不同的筛选方法筛选兼抗赤霉病和根腐病的突变体，用赤霉病菌和根腐病菌分生抱子直接接种在经筛选的愈伤组织上，进行抗病性鉴定。试验结果表明：不同筛选方法对筛选兼坑赤霉病和根腐病的愈伤组织的效果有明显差异，二

2、步筛选法比混合筛选法效果好。供鉴定的120块愈伤组织中，有村块愈伤组织具有兼抗赤霉病菌和根腐菌侵染的能力。关锐词：小麦赤霉病菌，小麦根腐病菌，离体筛选赤霉病（Fusariumgraminearum）和根腐病(Helmiuthosporiumsativum）分别是我国材料和方法小麦南方和北方产麦区的两大重要病害。近年（一）试验材料来，赤霉病有向北方、而根腐病有向南方蔓延的选用6个冬小麦和春小麦品种和杂种后代趋势，危害面积不断扩大，因此，培育兼抗赤霉的幼穗作外植体进行离体培养，幼穗长度为和根腐两种病害，又具有优良农艺性状的过硬0.5-1.Ocm,品种和抗源已成为目前育种家们迫切关注的问（二）培养

3、荃题。诱导愈伤组织的培养基用MS培养基附加自从Carlson(1973）首次采用离体选择2,4-D2mg/Lo继代培养基用MS培养基附加技术筛选出烟草抗野火病的再生植株以来，国2,4-D2mg/L、激动素0.5mg/L。选择培养基内外许多学者相继在马铃薯E91、玉米t}l首用MS培养基分别附加：(1)根腐病菌培养滤蓓[7,a1、r小麦167燕麦〔10,117和水稻CQ等作物上获得液3.0g/L;(2）赤霉病菌培养滤液0.5g/L;(3)成功，但在同厂作物中筛选出同时兼抗两种病害的突变体，迄今尚未见报道。本文报道中国GuoLi护manetal.:InvitroScreeningofMutant

4、sResistanttoFusariumgraminearumandHelms-科学院遗传研究所和河北农业大学自1989年nthosportumsativuminWheat1.SelectionofCallusResistanttoFusariumgramznearumand以来，应用组织培养和病菌培养滤液筛选技术，HelminthosporiumsativurnandDiseaseResista-并通过赤霉病菌和根腐病菌分生抱子直接接种nceAssayinWheat的抗病性鉴定，现已成功地获得兼抗赤霉病和＊本项研究得到国家自然科学基金的资助。参加本项工作的还有赵四维同志。根腐病的愈伤组织。

5、本文于1990年11月22日收到．4根腐病菌培养滤液1.独/L与赤霉病菌培养滤衰1小麦赤．菌株和根腐曹株培养派液毒力的测试结果液0.25g/L的混合培养基（生物测定表明，根腐赤霉29号菌株根腐002号菌株病菌培养滤液1.5g/L的毒力相当于赤霉病菌培养滤液0.25g/L的毒力）。培养滤液种子根长相对抑制培养滤液！种子根长相对抑制柿释怡ga(cm)根长柿释1I数(cm)根长（三）病菌培养滤液的制备(cm)(cm)CK2.80CK3.53分别从小麦赤霉病和根腐病严重发病地区6000.422.382001．731。80*收集的40个菌株中，用生物测验法，选出了产8000.662.144002.45

6、1.08生毒力强而稳定的赤霉病菌”号菌株和根腐10000.762.048003.110.4212000.84病菌002号菌株，作为供试菌株，将赤霉病菌291.96*1号菌株的菌体放在PDA培养基上，在250C培＊表示两种菌株培养滤液毒力相当。养7天后切菌丝块接种在PS培养基中，在250C将前述所选出的菌株用液体培养基培养，培养21天后，经过过滤、消毒和浓缩制成赤霉制备出培养滤液，然后对制出的两种培养滤液病菌培养滤液。将002号菌株的菌体放在改良用种子萌发方法测试毒力，以确定两个TITl株培Fries加麦汁的液体培养基中振荡培养15天养滤液毒力相当的配比，测试结果见表1。后，经过消毒和浓缩制成

7、根腐病菌的培养滤液。（二）不同筛选方法对筛选小麦兼抗赤霉（四）筛选方法病和根腐病愈伤组织诱导频率的影响1．二步筛选法将小麦幼穗先接种在含将冬小麦和春小麦品种及其杂种的幼穗分3.0g/L根腐病菌培养滤液的培养基上，待长出别接种在不同的选择培养基上诱导愈伤组织，愈伤组织后，再转到含0.5g/L赤霉病菌培养滤10天后观察到在不含病菌的培养滤液的对照液的培养基上，或将幼穗先接种在含0.5g/L赤培养基上，愈伤组织呈白