金莲花中牡荆苷对红细胞氧化损伤的保护作用

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1、分类号：单位代码：10092密级：学号：20101083金莲花中牡荆苷对红细胞氧化损伤的保护作用单位：专业：研究生姓名：导师姓名及职称：研究起止日期：提交El期：河北北方学院药学系药理学屈海琪安芳教授2012．4—2013．42013．5河北北方学院学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北北方学院所有。河北北方学院有权对本学位论文进行交流、公开和使用。导师签名：研究生签名：彦丁压哆、沙B年r月≥口日研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别

2、加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。导师签名：研究生虢彦俩堪沙，≠年岁月多b日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．4缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9研究论文金莲花中牡荆苷对红细胞氧化损伤的保护作用前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10日IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12结果⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．20附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．26附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．37结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．44参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．45综述金莲花黄酮与红细胞脂质过氧化损伤的研究概述⋯⋯⋯．52致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．70个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．71中文摘要金莲花中牡荆苷对红细胞氧化损伤的保护作用摘要金莲花(Trol

4、liuschinensisBunge)为毛莨科金莲花属(TrolliusL。)金莲花的干燥花及花蕾，金莲花总黄酮具有抑菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等功效，牡荆苷是金莲花黄酮单体，化学结构为47，5，7一三羟基黄酮一8一D一葡萄糖苷，牡荆苷具有抗病毒、体内外抗氧化和抗癌作用，通过抑制血栓形成、降低血黏度对缺血性心肌损伤具有保护作用。近年来对于自由基及其清除剂的研究成为热点，寻找、筛选具有阻断自由基形成或抑制细胞膜过氧化活性的天然黄酮类抗氧化药物研究越来越受到关注。目前对芹菜素、槲皮素，茶多酚等多酚类化合物对红细胞保护作用研究较多，而牡荆苷对人红细胞氧化损伤的保护作用研究尚未见相关报道

5、。本文以人红细胞作为实验材料，建立过氧化氢对红细胞氧化损伤模型，以维C作为阳性对照，研究牡荆苷及其苷元芹菜素对氧化损伤红细胞的抗氧化酶系、膜蛋白、不饱和脂肪酸等的影响，通过扫描电镜和透射电镜观察牡荆苷与芹菜素对红细胞形态结构的保护作用，比较牡荆苷与芹菜素的抗氧化能力及构效关系。建立氧化损伤模型以红细胞溶血率为指标，制备2％的红细胞悬液，加入一系列不同不同浓度的H202生理盐水溶液，37℃孵育，每隔30min取样测定溶血率，最终确定H202损伤浓度为400mmol·L～，孵育时间1．5h。实验分为正常对照组、模型损伤组、牡荆苷(15、30、60pg·mL。1)不同剂量组、芹菜素(1

6、5、30、6099·mL一)不同剂量组和维生素C(30pg·mL。1)阳性对照组。采用紫外分光光度计检测溶血率；通过试剂盒检测抗氧化酶(包括谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathioneperoxidase，GSH—Px)、超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase，SOD)和过氧化氢酶(Catalase，CAT))及ATPs(Na+-K+-ATPs、CaZ+_M92+_ATPs)酶活性，脂质过氧化产物、高铁血红蛋白(MetHb)、巯基中文摘要(hydrosulphonyl，．SH)及活性氧(ROS)含量；运用SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)分析红细胞膜蛋白

7、；通过扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察红细胞表面形态和超微结构。结果表明：与正常组相比：模型组红细胞溶血率、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量、MetHb含量、ROS含量均升高，具有显著性差异(尸