雷公藤内酯醇抑制膀胱癌细胞的作用机制研究

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1、隶劫大◆璺临床医学硕士学位论文雷公藤内酯醇抑制膀胱癌细胞的作用机制研究研究生姓名：钟旭锋MechanismoftriptolideinhibitthegrowthofbladdercancerAThesisSubmittedtoSoutheastUniversityIiiiiiiiiiiiiiIIiIiiiiiiiIiiiiiplllllllrlllllllllY2511896FortheClinnicDegreeofMasterofMedicineBYZhongXu-fengSupervisedbyProfessorZhangGu-f

2、ianSchoolofMedicalCollegeSoutheastUniversityMay2013缩略词表缩略词英文全称中文全称BSABullserumalbumin牛血清蛋白PBSDMEMFBSPBSTDMSOMTTPIBSASDSDAPITEMEDDDPTPTHPMSFEDl=APhosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲溶液Dulbecco’SModifiedEagleMedium复合氨基酸葡萄糖培养基FetalBovineSerumPhosphateBufferedSalineTween20dimethyls

3、ulfoxide3-(4，5一Dimethylthiazol-2一y0-2，5-diphenyltetrazoliumbromidePropidiumIodideNucleicAcidStainN．0一Bis(trimethylsilyl)acetamidedodecylsulfate，sodiumsalt4’．6一diamidino一2-phenylindoleN，N，N’，N'-Tetramethylethylenediaminecis-diamminedichloroplatinumtriptolidehourPhenylmeth

4、anesulfonylfluorideEthyleneDiamineTetraaceticAcid胎牛血清聚山梨酯磷酸盐缓冲液二甲基亚砜3．(4，5．二甲基噻唑-2)一2，二苯基四氮唑溴盐碘化丙啶N，O-双(三甲基硅基)乙酰胺十二烷基硫酸钠4’，6．二脒基一2一苯基吲哚N，N，N。，N’．四甲基乙二胺顺铂雷公藤内酯醇小时苯甲基磺酰氟乙二胺四乙酸中文摘要雷公藤内酯醇抑制膀胱癌细胞的作用机制研究目的研究雷公藤内酯醇对人类膀胱癌T24细胞是否有抑制作用及其机制，探讨雷公藤内酯醇、顺铂联合用药是否具有协同作用，及雷公藤内酯醇与膀胱癌细胞自噬发生

5、的关系。方法采用人类膀胱癌T24细胞株，以雷公藤内酯醇及顺铂单独及联合作用下进行细胞毒性实验，观察细胞死亡和生长状态，比较药物对T24细胞的生长抑制作用。应用AnnexinV／PI双染色法流式细胞仪测定细胞早期凋亡，观察细胞在不同药物及浓度作用下的细胞凋亡情况。应用PI单染色法流式细胞仪测定细胞周期，观察雷公藤内酯醇作用下细胞周期变化。应用免疫荧光法和蛋白印迹法检测药物作用后的自噬标志物LC3．II蛋白，探究雷公藤内酯醇与T24细胞自噬发生的关系。结果细胞毒性试验结果示24、48小时雷公藤甲素IC50分别为41．5±2．327ng／ml

6、、28．3±2．026ng／ml(均P

7、瘤作用，并呈时间及浓度依赖性。流式细胞术测定细胞早期凋亡结果示对照组细胞凋亡率为(8．03±1．51)％，顺铂组、雷公藤内酯醇组细胞凋亡率为(32．33±0．70)％、(34．47±0．65)％(均P

8、、II中文摘要48小时的G2期细胞的比率为(24．75±1．86)％、(29．37±1．97)％，明显高于正常对照组的(0．82±0．55)％、(4．47±0．80)％(均P<0．05)，这证明雷公藤内酯醇