雷公藤内酯醇对大鼠急性脊髓损伤的保护作用研究

雷公藤内酯醇对大鼠急性脊髓损伤的保护作用研究

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时间:2019-03-08

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1、分类号R6密级公开UDC硕士学位论文雷公藤内酯醇对大鼠急性脊髓损伤的保护作用研究学位申请人:魏世坤学科专业:外科学指导教师:赵红卫副教授二○一三年五月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineProtectiveEffectsofTriptolideontheAcuteSpinalCordInjuryofRatsGraduateStudent:WeiShikunMajor:SurgerySupervi

2、sor:Prof.ZhaoHongweiChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMay,2013三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果,除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明,本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名:日期:三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认:我作

3、为三峡大学硕士研究生在校学习期间,在导师指导下,依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺:我有义务维护三峡大学的知识产权,凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果,或实验数据为基础所形成的研究论文及成果,无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励,均以三峡大学为第一作者单位或完成单位,并事先征得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。学位论文作者签名:日期:I三峡大学硕士学位论文内容摘要目的:探讨雷公藤内酯醇(Triptolide,Tri)对大鼠急性脊髓损伤的保护

4、作用,为应用Tri治疗急性脊髓损伤提供一定的理论基础及实验依据,为临床治疗急性脊髓损伤提供一种新的思路及方法。方法:60只SPF级SD大鼠随机分为4组,分别为Tri组(18只)、阳性对照组甲基强的松龙(Methylprednisolone,MP)组(18只)、单纯损伤组(18只)、空白对照组(6只)。空白对照组大鼠不做任何处理,其它三组大鼠通过摸肋骨方法定位大鼠T11胸椎,暴露大鼠脊髓后以Nystrom法压迫脊髓造模。造模成功后,按实验设计分别给药:空白对照组不做任何处理;Tri组大鼠术后立即行Tri腹腔注射,注射量为0.4mg/kg

5、,以后每日注射1次,最长持续7天;MP组大鼠术后立即行大剂量MP腹腔注射,注射量为30mg/kg,8小时重复一次,以后每日注射1次,最长持续3天;单纯损伤组术后立即行生理盐水腹腔注射,注射量为3ml/kg,以后每日注射1次,最长持续7天。术后第3天,取各组大鼠各3只,行SCI大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能检测。Tri组、MP组及单纯损伤组三组大鼠在术后1、3、5、7、14天各时间点取各组大鼠3只,先做BBB评分及斜板实验,然后处死大鼠取伤处脊髓组织做HE染色及生长相关蛋白43(GrowthAssociatedProtein-43,GAP-4

6、3)免疫组化检测,同时酶联免疫吸附试验(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay,ELISA)法检测大鼠血清中抑炎因子白细胞介素10(Interleukin-1,IL-10)及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TumorNecrosisFactor-α,TNF-α)的含量变化。空白对照组大鼠术后1、3、5、7天各时间点只做BBB评分及斜板实验不处死,术后第14天行BBB评分及斜板实验后处死取材、取血行相关检查。结果:(1)BBB评分及斜板试验结果:术后1、3、5、7天各时间点各手术组BBB评分及斜板试验结果较空白对照组低(

7、P<0.05);各手术组间差异无统计学意义(P>0.05);术后14天,各手术组BBB评分及斜板试验较空白对照组低(P<0.05);各手术组间比较,Tri组大鼠BBB评分及斜板试验结果较MP组及单纯损伤组高(P<0.05);MP组与单纯损伤组结果无显著差别(P>0.05)。(2)GAP-43免疫组化显示:术后1天各手术组GAP-43免疫组化IOD值较空白对照组高(P<0.05);各手术组间差异无统计学意义(P>0.05);术后3、5、7、14天各时间点各手术组GAP-43免疫组化IOD值较空白对照组高(P<0.05);各手术组间比较,

8、Tri组大鼠GAP-43免疫组化IOD值较MP组及单纯损伤组高(P<0.05);MP组与单纯损伤组结果无显著差别(P>0.05);(3)HE染色显示:空白对照组脊髓未见明显组织学变化。术后1天损伤部位有出血淤血,神经元出

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