DB14∕T 1591-2018 草莓脱毒原原种苗制备技术规程

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1、ICS65.020.20B05DB14山西省地方标准DB14/T1591—2018草莓脱毒原原种苗制备技术规程2018-01-10发布2018-03-10实施山西省质量技术监督局发布DB14/T1591—2018目次前言................................................................................II1范围...........................................................

2、...................12规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14外植体的选择......................................................................1

3、5脱毒与检测........................................................................16茎尖的初代培养....................................................................27组培苗的继代扩繁..................................................................28组培苗的生根诱导.............

4、.....................................................29组培苗的驯化移栽..................................................................3附录A（资料性附录）草莓脱毒原原种苗组培生产记录表..................................4附录B（资料性附录）草莓脱毒原原种苗出圃登记表......................................5ID

5、B14/T1591—2018前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山西省农业科学院提出并归口。本标准起草单位：山西省农业科学院果树研究所。本标准主要起草人：刘伟、樊新萍、王国平、陈冲、霍辰思、曹贵寿、史华平、尚勇进。IIDB14/T1591—2018草莓脱毒原原种苗制备技术规程1范围本标准规定了草莓脱毒原原种苗制备的术语和定义、外植体的选择、脱毒方法、茎尖的初代培养、组培苗的继代扩繁、生根诱导及驯化移栽。本标准适用于草莓脱毒原原种苗的制备。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用

6、是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T406脱毒草莓种苗病毒检测技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1草莓脱毒原原种苗脱毒的草莓组培苗移栽于无草莓病源、虫源的隔离区内成活的植株。3.2微茎尖脱毒从匍匐茎上切取约0.2mm茎尖分生组织接种至培养基中，分化出的组培苗可有效脱除病毒。4外植体的选择4.1选择标准选取健壮、无病、开花结果正常的草莓植株作为母株，采集刚抽出且叶片未展开的匍匐茎作为外

7、植体材料。4.2采集时期外植体宜在结果后期匍匐茎大量抽生阶段进行采集。5脱毒与检测5.1脱毒方法1DB14/T1591—2018采用微茎尖脱毒法对草莓匍匐茎外植体材料进行脱毒处理。5.2病毒检测依据NY/T406的要求执行。6茎尖的初代培养6.1初代培养基的选择草莓茎尖初代培养的培养基为MS+0.5mg/L～1.0mg/L6-BA，添加蔗糖30g/L，调节培养基pH值至5.8。6.2外植体消毒方法切取匍匐茎顶端2cm左右作为外植体进行消毒，流水冲洗0.5h～2h。在超净工作台下，用75%酒精将外植体浸泡

8、30s，再用1.0%次氯酸钠消毒10min～15min或0.1%升汞溶液消毒5min～10min，无菌水冲洗3～5次。所用消毒液与外植体体积的比例约为10:1。6.3茎尖分生组织切取将消毒后的外植体用无菌滤纸吸干水分。在解剖镜下用镊子将外植体顶端一层一层小心剥开，直至露出茎尖分生组织部分，用锋利的解剖刀切取约0.2mm的茎尖，接种于初代培养基中。6.4初代培养条件初始接种的茎尖暗培养2d，之后转置于常规培养条件下培养，培养温度25℃，光照强