gpc3在肝细胞癌转移及侵袭中的作用及机制研究

《gpc3在肝细胞癌转移及侵袭中的作用及机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、南方医科大学2010级博士学位论文GPC3在肝细胞癌转移及侵袭中的作用及机制研究StudiesofgeneGPC3intheinvasionandmetastasisofhepatocellularcarcinoma课题来源：自选题目学位申请人导师姓名专业名称培养类型培养层次所在学院阮健罗荣城肿瘤学学术型博士第一临床医学院2013年4月20日广州博士学位论文GPC3在肝细胞癌转移及侵袭中的作用及机制研究研究生：阮健导师：罗荣城教授，杨洋教授摘要肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一，以亚洲和非洲高发。近些年西方发达国家的H

2、CC发病率也呈上升趋势，尤其是美国和加拿大Ⅲ砼1。我国是世界上HCC高发地区之一，每年发病人数约为30万人，位于常见肿瘤的第3位。此外，我国肝癌的年死亡率为20．40／10万，其中城市为19．98／10万，农村为23．59／10万，分别居恶性肿瘤死亡率的第二位和第一位【3，41。手术切除仍然是治愈早期肝癌的最佳选择，然而，即使是根治性切除之后，60％．70％的患者在术后5年内会发生转移和复发【5，6J。尽管一些临床因素(如肿瘤分化程度、肿瘤大小、是否脉管侵润等)与患者预后密切相关，但是HCC的发生发展的分子机制目前仍不明确，因此，探索肝癌的发病基础及转移复发的相关因素，寻找肝癌

3、早期诊断、预测转移复发的生物指标和靶向治疗的靶点，是目前肿瘤学研究的迫切任务之一。硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPGs)是一类携带一条或多条硫酸乙酰肝素链的蛋白【71。这些肝素链是由长线状的葡糖醛酸聚合物／N．乙酰氨基葡糖重复双糖单位组成。链的长度高度均可变，大部分双糖单位都受N一去乙酰化、去硫酸化、差向异构化和O．去硫酸化的调节。去乙酰化诱导了硫酸乙酰肝素链产生高强度的负电荷，从而允许硫酸乙酰肝素糖蛋白以较为杂乱的方式与带有正电荷区域的蛋白产生相互作用，其中包括了一些所谓的“肝素结合生长因子”，如成纤维细胞生长因子(FGFs)，Wnt，Hedgehogs(Hhs)和骨形态发生蛋白

4、(BMPs)18，9J。磷脂酰肌醇蛋白聚糖(GPC)是硫酸乙酰肝素糖蛋白家族中的一员，它的成员通中文摘要过磷脂酰肌醇锚(GPI)连接于细胞表面。哺乳动物的基因组包括了GPC家族的六个成员：(GPCI至GPC6)，还有其他两个成员在果蝇中发现(dally和dip)00，1l】oGPC3基因定位于人染色体Xq26．1区，编码的GPC3蛋白的相对分子质量约为70Kda，由580个氨基酸组成。GPC3的核心蛋白由两个部分组成，分别40kDa的GPC3氨基端(N．)片段及30kDa的GPC3羧基端(C．)片段【12，131。1996年，Pilia等首先报道了GPC3基因突变和功能缺失的患

5、者出现了过度生长综合征(SGBS)，这是一种X连锁异常的疾病，主要表现为产前、产后胎儿的过度生长，并伴有广泛的内脏和骨骼的异常，同时还会增加胚胎源性肿瘤发生的可能性【l引。随后的研究又表明，GPC3的突变会导致细胞凋亡和细胞增殖的比例失调，而这可能是肿瘤发生发展的重要原因之一【15，161。GPC3还可与肝素结合型蛋白相结合，如基质成分、细胞粘附分子、酶和酶抑制物、生长因子等，参与调节细胞分化、增殖、粘附和迁移等生理过程等，除此之外，其还可能参与调节一部分中胚层组织和器官发育的过程【l71。随后有大量的研究报道表明GPC3在肝细胞癌、恶性黑色素瘤、Wilm’S瘤、大肠癌、肝胚细

6、胞瘤和成神经细胞瘤高表达，而在间皮瘤、乳腺癌、肺腺癌以及卵巢癌中表达显著下调，提示GPC3在肿瘤的发生发展中起着重要的作用【18'191。本课题组前期已完成以下的研究工作：应用免疫组化及组织芯片技术，通过检测36例原发性肝细胞癌组织和33例原发性肝癌癌旁组织以及一些其他常见肿瘤组织和其癌旁组织中GPC3蛋白的表达情况。结果表明：(1)36例原发性肝细胞癌组织及33例原发性肝细胞癌癌旁组织中GPC3蛋白的表达率分别为66．17％(24／36)，3．0％(1／33)，两者之间差异有显著性；(2)GPC3蛋白在原发性肝细胞癌、肺鳞癌、癌旁慢性浅表性胃炎组织中表达，而乳腺癌、胃癌、胰腺

7、癌、卵巢癌、宫颈癌、胆管细胞癌组织中无表达；(3)原发性肝细胞癌组织中GPC3蛋白表达与患者性别、年龄、病理分级无显著相关性。随后我们收集和分析了61例原发性肝细胞癌患(HCC)者术后标本切片，比较GPC3高表达博士学位论文患者与GPC3低表达患者之间的生存时间差异。结果表明，GPC3的表达与接受手术患者的转移／复发高度相关，GPC3高表达的术后患者发生转移或者复发的风险是低表达患者的3．214倍。生存分析显示GPC3高表达的肝癌患者预后显著差于低表达者。此外，多变量分析提示GPC3在HCC