贝达变异株系耐盐性鉴定及耐盐基因的rapd标记

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1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学硕士学位论文贝达变异株系耐盐性鉴定及耐盐基因的RAPD标记StudiesonSalt-toleranceIndentificationandRAPDMarkerSalt-toleranceGenefor‘beta’李伟指导教师姓名陈佰鸿教授（甘肃农业大学农学院兰州730070）学科专业名称果树学研究方向果树生物技术论文答辩日期2012年5月25日学位授予日期2012年6月21日答辩委员会主席王发林研究员评阅人张金文教授杨宁副教授2012年5月甘肃农业大学2012届硕士学位论文缩略词英文缩写英文全称中文名称RAPDRandom

2、AmplificationPolymorphism随机引物扩增多态性SSRSimplesequencerepeat简单重复序列ISSRInter-Simplesequencerepeat简单序列重复区间SCARSequencedCharacterizedAmplified序列特征扩增区域BSABulkedsegregantanalysis分离群体分组混合分析法PCRPolymerasechainreaction聚合酶连锁反应CTABCetyltriethylammoniumbromide十六烷基三乙基溴化胺dNTPDeoxynudepsidetriphosphate脱氧

3、核糖核苷三磷酸Taq酶ThermasaquaticusDNApolumerase嗜热、水生菌DNA聚合TrisHydroxymethyaminomethane三羟甲基氨基甲烷EDTAEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸TEMEDN，N，N’，N’-tetramethylethylenediamineN，N，N’，N’-四甲基乙二胺EBEthylenebromide溴化乙锭OD值OpticalDensity光密度值µLmicrolitre微升BpBasepairs碱基对MDAMalondialdehyde丙二醛ProProline脯氨酸

4、I甘肃农业大学2012届硕士学位论文摘要我国西北地区葡萄种植面积较广，但该区冬季干燥严寒，且土壤盐渍化程度较高，严重阻碍了葡萄产业的发展，因此选育抗冻耐盐的砧木和品种是一个亟待解决的问题。本研究以45个贝达葡萄变异株系(编号‘1’～‘45’)和4个砧木品种‘(贝达’、‘SO4’、‘山河系’、‘5BB’)一年生成熟枝条为试材，研究了它们在0.1%NaCl溶液间隔7天5次处理后的盐害指数、电导率、以及游离脯氨酸、丙二醛、叶绿素含量的变化，并通过聚类分析、相关分析对其耐盐性进行综合评价，并对材料进行RAPD标记取得了下列研究结果：1.在NaCl终浓度达到0.578%时，在45

5、个贝达变异株系中有2个株系（‘43’、‘16’）仍能较好的生长，耐盐性最好。2.随着NaCl处理次数的增加，各品种的叶绿素含量呈逐渐降低的趋势，而叶片的电导率、游离脯氨酸、丙二醛含量却逐渐升高，并且各品种和株系升降的速度和幅度有明显差异，其中‘贝达’和‘SO4’升降最快、幅度最大，贝达变异株系‘43’和‘16’升降最慢、幅度最小。说明葡萄叶片的盐害指数、相对电导率、MDA含量以及叶绿素含量的变化可以作为评价葡萄耐盐性的鉴定指标。3.在初选的6个材料和4个砧木品种中，各项指标的升降幅度大小顺序与其耐盐性强弱顺序一致，其耐盐性由强到弱依次为‘43’>‘16’>‘5BB’>‘

6、42’>‘32’>‘36’>‘23’>‘山河系’>‘SO4’>‘贝达’。4.通过聚类分析将供试材料分成了三类，耐盐性强的为‘43’、‘16’、‘5BB’、‘36’、‘42’、‘32’；耐盐性中等的为‘1’、‘2’、‘3’、‘5’、‘7’、‘8’、‘13’、‘15’、‘17’、‘21’、‘22’、‘23’、‘24’、‘29’、‘31’、‘33’、‘35’、‘37’、‘38’、‘39’、‘41’；而对盐分比较敏感的为‘贝达’、‘SO4’、‘山河系’。5.通过RAPD标记筛选结果表明，引物OPR15在耐盐性强的株系（‘43’、‘16’、‘5BB’、‘32’、‘42’）中都扩增

7、出了一条1400bp的条带，有可能作为葡萄耐盐辅助选择的分子标记。关键词:葡萄；耐盐性；生理指标；RAPD标记II甘肃农业大学2012届硕士学位论文SummaryGrapeisplantedwidelyinnorthwesternofChina,buttheweatherisverycoldinwinter,thedegreeofsalinizationisveryserious,andhinderedthedevelopmentofgrapeindustryseriously,sobreedingstrongsalttolerances