小鼠非手术胚胎移植研究

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1、万方数据分类号：S墨13：三密级：公珏单位代码：!QQ墨鱼学号：2Q!13墨§小鼠非手术胚胎移植研究Non——surgicalembryotransferinmice学位申请人：崔利芳指导教师：李相运教授学科专业：动物遗传育种与繁殖学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一四年五月二十五日万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑坐壑些盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过

2、的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：力潲蔫签字日期：印¨年舌月二日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑蔓垦盎些盘堂．有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权亟耋堡盘些盘茔可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：力晦怯签字日期：Vfb年易月二日学位论文作者毕业后去向：工作单

3、位：通讯地址：导师签名：耋南。色签字日期：少J侔6月乙目电话：邮编：万方数据河北省自然科学基金项目资助(批准号：C2012204047)SupportedbyNaturalScienceFoundationofHebeiProvince(No．C2012204047)万方数据摘要小鼠非手术法胚胎移植相对手术法胚胎移植的成功率较低，这制约了非手术法胚胎移植的广泛应用。但与手术法相比，非手术法简便快捷、不易污染、费用低，且能对小鼠损伤小，无需专业的手术器械。本实验从麻醉剂种类、激素调节、假孕鼠天数、移植器械的材质、移植管径、管长、弧度、模拟移植、

4、移入液体和空气体积、移入胚胎数量和移植方法等方面对非手术法进行改进，改善传统的非手术胚胎移植方法，提高了胚胎移植的成功率。在麻醉剂实验中，不同麻醉剂和不麻醉组的差异均不显著(P>0．05)。2．5d和3．5d假孕鼠的手术法移植成功率差异显著(P<0．05)，非手术移植成功率的差异不显著(尸>O．05)，2．5d假孕鼠的手术法和非手术法移植效率差异显著(JP<0．05)，3．5d假孕鼠的非手术法移植效率没有显著提高。在小鼠进行胚胎移植之后，两组小鼠分别皮下注射0．1ml20ug／ml的雌激素和孕酮，补充孕酮的移植成功率为35．7％；补充雌激素的

5、小鼠只有一只发生了妊娠，其他均未妊娠。采用玻璃管和PTFE管的移植成功率分别为55．9％和72．4％，差异显著(P<0．05)；同样采用PTFE管，管径为6009in和750j．tm组的移植管的产仔率为72．7％和54．2％，差异显著(尸<0．05)，4501．tm组的产仔率70．5％与其它两组差异均不显著；移植管的长度分1．5cm、2．0cm、2．5cm和3．0cm四组，产仔数分别为60．4％、64．0％、71．1％和57．7％，四组差异均不显著(P>0．05)。体外培养胚胎的移植，将1．细胞胚胎、2．细胞胚胎体外培养至囊胚阶段(E3．5d

6、)移植到2．5d假孕鼠体内，IVF胚胎体外培养至囊胚阶段移植到3．5d的假孕鼠体内。结果表明手术法与非手术法差异均不显著(p0．05)。本实验改进了传统的非手术法胚胎移植，提高了移植成功率，与手术法效率相当。且非手术法胚胎移植符合实验动物伦理原则。重要的是，它为人类、牛和其他大动物的胚胎移植提供了研究模型。关键词：小鼠：非手术胚胎移植；麻醉剂；假孕天数；激素万方数据Non-surgicalembryotransfermethodinmicePostgraduate：LifangCuiMajor：AnimalGenetics，Breedinga

7、ndReproductionDirection：MolecularBioteehnologyandAnimalBreedingSupervisor：XiangyunLiAbstraetNon—sur西caJembryotransferinmicehasalowersuccessratethansurgicalembryotransfer,andthislimitsthewideapplicationofthenon·surgicalembryotransfer．Compared、IⅣitllsurgicalembryotransfer,non

8、-surgicalembryotransferwassimpler,lowerpollution，lowercost，andsmallerinjuryformice