低温β-半乳糖苷酶菌株的筛选

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1、鬟第3’1卷第4期食民品叩研I究与-J开丌发蹑生物工程136低温13一半乳糖苷酶菌株的筛选马宏伟，王聪。胡立新·‘(1．内蒙古蒙牛阿拉乳制品有限责任公司，北京101107；2．湖北工业大学化学与环境工程学院，湖北武汉430068)摘要：从内蒙古宝格达山高山冻土以及乳制品中分离到25株嗜冷茵，利用产低温3-半乳糖苷酶的模型筛选，获得1株低温酶高产茵株C。在以乳糖为主要碳源的发酵培养基中，该低温酶的最适pH值为6．4，最适作用温度为32℃，不同金属离子对酶活影响：MnM十>KNacaFecuzn“。4℃相对酶活为总酶活的30％。关键词：乳帝】品；嗜冷茵；低温3-半乳糖

2、苷酶；酶学性质Low—temperaturep—galactosidaseStrainScreeningMAHong—wei．WANGCong．HULi—xinz(1．InnerMongoliaMengniuAllahDairyCo．，Ltd．，Beijing101107，China；2．SchoolofChemicalandEnvironmentalEngineering，HubeiUniversityofTechnology，Wuhan430068，Hubei，China)Abstract：FromtheInnerMongoliabogdshanmountai

3、npermafrost，aswellasdairyproductswereisolated25cold—resistantbacteria，theuseoflow-temperatureB—galactosidasemodelofscreening，accesstoonel0w—producingstrainsofC．Withlactoseasthemaincarbonsourceinthefermentationmedium，theoptimumpHvalueoflow—temperatureenzymewas6．4，theoptimumreactiontemp

4、eraturewas32℃，diferentmetalionsontheactivityofenzymeimpact：Mn+>MgKNaCaFeCuZn2+．4℃relativeactivityofthetotalactivityof30％．Keywords：dairyproducts；psychrophilicbacteria；low—temperature13-galactosidase；enzymaticproperties新鲜乳制品的冷藏保鲜加工以及生产低乳糖牛脂牛奶10g，琼脂2g，蒸馏水100mL，pH7．0)，淀粉分奶与乳制品需要在低温条件下具有高活

5、性的B一半乳解培养基(乳糖25g，酵母粉5g，蛋白胨10g，葡萄糖糖苷酶【l1，但目前低温生产所用的常温B一半乳糖苷酶10g，可溶性淀粉20g，琼脂25g，蒸馏水l000mL，pH的酶活力都很低而且成本较高[21，难以满足市场及生7．0)，Tween80分解培养基(乳糖25g，蛋白胨20g，产所需。为解决相关问题，应首先着手于对低温B一半NaCl10g，CaC12"7H200．2g，Tween8020mL，琼脂30g，乳糖苷酶菌株的分离筛选翻。分离筛选出低温分解乳蒸馏水1000mL，pH7．0)，纤维素分解培养基(乳糖糖高酶活菌株，并对其低温B一半乳糖苷酶性质进行

6、25g，蛋白胨20g，酵母粉l0g，KH2PO41g，MgSO4·研究。7H2O0．5g，NaC110g，cMc—Na15g，琼脂25g，蒸馏水1000mL，PH7．0o1材料与方法1．1I3仪器1．1材料数码型生物显微镜XSP一13CD：上海豫光仪器有1．1．1菌种限公司；723PC分光光度计上海精密仪器仪表公司；由内蒙古宝格达山高山冻土中分离纯化得到。恒温水浴箱：WHC一15宁波赛福实验仪器厂；V型温度1．1．2培养基计：常州市新华仪表厂；PH一8414便携式PH计：广州试验所用培养基：牛奶分解培养基(乳糖25g，脱市铭睿电子科技有限公司。1．2菌株的分离作者

7、简介：马宏伟(1973—)，男(汉)，硕士，研究方向：食品加丁工艺。将内蒙古宝格达山冻土样品取1g放入500mL}通讯作者：胡立新，1966，男，副教授。的富集培养基中，于15oC，150dmin，摇床培养3d。取生物工程食品研究与开发第20310卷年第44月期137===·富集菌悬液，稀释涂布于选择培养基上，l5cI=培养2d，挑选单菌落，测定乳糖酶活性并进行复筛。1．3产低温酶菌株的筛选嘲划线培养牛奶分解培养基平板上，在5℃培养3d～5d后观察在平板上是否有半透明分解圈。划线培养淀粉分解培养基平板上，在5℃培养6d后观察在平板上是否有无透明分解圈。将划线培养T

8、ween8