隔日限食疗法对大鼠急性脊髓损伤后神经保护作用的机制研究

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1、学位论文隔日限食巧法对大鼠急性脊髓损伤后神经保护作用的机制硏究Themechanismresearchofneuroprotectioneffectof*ever-other-dafasitininratsafteracut:esnalcordinuryygpjy刘建成指导教师姓名:张安仁主巧侯师申请学位级别:硕±专业名称:康复医学与理疗学论文提交时间:2015年4月论义答辩时间:2015年5月二。一五年五月成都中医巧大学巧主学位论文中文摘要'--目的:观察隔日限食疗法(6¥6巧0也61

2、(137位511蜡,£0〇?)对大鼠急性脊髓损伤(acuteSpinalcordinurASCI)后运动功能、脊髓神经细胞调亡、炎性因子jy,及血清炎性因子的影响,了解神经细胞调亡、炎性反应和运动功能恢复之间的关系,从抗调亡、抗炎方面初步探讨EODF对ASCI的神经保护作用及其可能机制。为EODF用于临床治疗ASCI提供实验依据。4=t方法:将8只雌性成年Wisar大鼠,随机分成EODF组(A组,n16)、'正常饮食对照组==(B组,n16)、假手术组(C组,n16)。采用改良Alelns打击法建立Wistar大鼠胸段脊髓损伤模型。A

3、组于术后立即给予EODF,B组及C组给予正常饮食。各组大鼠分别于术后化、Id、3d、7d斤动物行为学BBB评分(BassoBeatieandBresnahanscores,BBBscores)观察大鼠运动功能变化后处死,-伊红-取损伤段脊髓姐织行石蜡切片后,通过苏木素(HematoxylineosinHE)染,色来观察脊髓组织结构变化,并通过免疫组化检测(SP法)观察调t相关蛋白---Bcl2、Baxaase3--及C邓的表达情况,观察炎性因子白介素6(lnterleukin6,比6、)'-10(虹16116-10-白介素,11^1

4、0表达情况加11佩;运用£〇¥入法检测各组大鼠血清--中比6、正10的含量。1结果:.斤为学观察结果:脊髓损伤后化,A、B两组均表现出双后肢擁疾的严重运动功能障碍,BBB评分均为0.00±化00,与C组比较,差异有统计学意义(户<化01);随时间延长,A、B两组BBB评分均呈上升趋势,在脊髓损伤3d后,A,.)A、B两组比较差异有统计学意义(戶<001,组出现后肢H个关节(、)BBB评.+髓膝,0.82,而B组、躁关节的轻微活动分为400仅出现髓、一+化,评分为1至脊髓损伤,A膝到两个关节的轻微活动.7550;7d后、B两组差异有

5、统计学意义(^<化〇1),A组可见足底负重位及足背负重步行,BBB评分+一为9,而B组仅见两个关节轻微活动及.000.82个关节的较大幅度活动,BBB评分为5.50±1.29。2丑EA、B两组经造模后脊髓组染色结果:织均可见不同程度的出血灶、炎性细胞浸润W及空洞形成,,可见明显的神经细胞变性灰白质界限欠清较之;B组AEODF于,组经干预后病理学改变可见改善,灰白;C组脊髓结构规则质界限分明,白质致密,无明显出血、水肿、炎细胞浸搁。3.免疫姐化结果:ase-B化后-(1)Cas3、ax,与C组比较,A、B两组Casasep:脊髓损伤p

6、34.67++表达(分别为30.98,354±.17)Bax(90.,.1.93及表达分别为39.082406±109)均尸<1B.明显增加,差异有统升学意义〔0.0);随时间延长,A、两组1巧日限食巧法对大鼠急性脊巧损伤后神经化护作用巧机制巧究-Casase3及Bax表达均呈先升后降趋势,峰值均出现在Id3dp,在脊髓损伤后,asase-+09+A组Cp3、Bax表达均值06.87.77,30.84)小于B姐(31.47+1.56,39.的±0.88),差异有统计学意义<0.01);至脊髓损伤7d后

7、,A組-(++显小于B+Casase3,(p、Bax表达均值21.750.9931J61.90)明姐31.432+.09,39.011.65)差异有统计学意义(戶<0.01)。提示EODF可减少脊髓組,asase-3织中C、Bax的表达。p-化后-(2)Bd2C姐比A、B两组Bl2表达!与较,脊髓损伤,c(分别为12.05+1.12,10.7化0.72)均明显増加,差异有统计学意义(戶<0.01);随时间c-延长,A、B两组Bl2表法均呈先升房降趋势,峰值出现在3d,在脊髓损伤Id、c-++3d、

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