促红细胞生成素通过抑制自噬作用减轻肺缺血再灌注损伤

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1、分类号：R655.3学校代码：10114密级：学号：021530405硕士学位论文促红细胞生成素通过抑制自噬作用减轻肺缺血再灌注损伤Erythropoietinreduceslungischemia-reperfusioninjurybyinhibitingautophagy研究生：吴小敏指导教师：郭光伟教授专业名称：外科学研究方向：肺保护研究学位类型：专业学位所在学院：第二临床医学院中国山西二〇一八年三月二十日分类号：R655.3学校代码：10114密级：学号：021530405促红细胞生成素通过抑制自噬作用减

2、轻肺缺血再灌注损伤Erythropoietinreduceslungischemia-reperfusioninjurybyinhibitingautophagy研究生：吴小敏指导教师：郭光伟教授专业名称：外科学研究方向：肺保护研究学位类型：专业学位所在学院：第二临床医学院中国山西二〇一八年三月二十日目录中文摘要………………………………………………………………………………Ⅰ英文摘要………………………………………………………………………………Ⅲ常用缩写词中英文对照表……………………………………………………………Ⅴ前

3、言……………………………………………………………………………………11实验材料及步骤……………………………………………………………………41.1实验材料……………………………………………………………………41.2试验仪器及实验试剂………………………………………………………41.3分组…………………………………………………………………………51.4造模…………………………………………………………………………51.5检测…………………………………………………………………………51.6统计………………………………………

4、…………………………………72结果………………………………………………………………………………82.1血气分析结果…………………………………………………………………82.2肺组织W/D值………………………………………………………………82.3肺泡损伤率………………………………………………………82.4大鼠肺组织LC3、Beclin-1的表达情况………………………………………93附图………………………………………………………………………………104讨论………………………………………………………………………………12

5、5结论………………………………………………………………………………14参考文献………………………………………………………………………………15综述…………………………………………………………………………………19参考文献………………………………………………………………………………24致谢…………………………………………………………………………………29个人简历………………………………………………………………………………30山西医科大学（博）硕士学位论文促红细胞生成素通过抑制自噬作用减轻肺缺血再灌注损伤摘要目的：探

6、讨促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）能否通过抑制自噬作用对大鼠肺的缺血再灌注损伤（ischemiaandreperfusioninjury，IRI）起到保护作用。方法：把健康状况良好的40只成年雄性Wistar大鼠编号，利用抽签法随机为五组，分别为：假手术组（Sham组）、缺血/再灌注处理组（I/R组）、促红细胞生成素处理组（EPO组）、促红细胞生成素+雷帕霉素（Rapamycin）处理组（EPO+Rap组）和自噬激活剂雷帕霉素处理组（Rap组），各8只。构建大鼠肺缺血再灌注模型。再灌注结束后

7、经胸主动脉取动脉血测定动脉血氧饱和度（PaO2）；大鼠处死后取右肺上叶，称湿重、烘干后称干重，计算湿干重比（W/D），把其余右肺组织制成石蜡切片，苏木精-伊红（HE）染色后电镜下观察肺组织的病理变化；用免疫荧光双染色法观察自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的染色情况。结果：I/R模型组中动脉血PaO2与Sham相比大幅降低，I/R模型组中肺湿干重比与Sham相比明显升高，LC3、Beclin-1蛋白表达水平也明显升高（P﹤0.05），肺组织结构出现明显损伤。EPO组动脉血中PaO2值与I/R相比显著增大，肺湿干

8、重比及LC3、Beclin-1蛋白表达水平却明显变小（P﹤0.05），肺组织结构破坏程度显著降低。促红素能削弱Rapamycin的作用。结论：I山西医科大学（博）硕士学位论文自噬作用参与到了肺缺血再灌注损伤过程，促红细胞生成素对大鼠肺组织肺缺血再灌注损伤的保护作用与自噬有关，自噬水平升高可以加重肺的缺血再灌注损伤。关键词：肺缺血再灌注损伤；促红细胞生成素；自噬；雷帕霉素I