局部应用鼠神经生长因子对大鼠视神经的保护作用的研究

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1、温州医科大学硕士学位论文分类号：R77单位代码：10343学号：151003600硕士学位论文论文题目:局部应用鼠神经生长因子对大鼠视神经的保护作用的研究研究生姓名：陈园园学科专业：眼科学类型：专业型指导教师：吴文灿教授南开辉研究员二O一八年六月1温州医科大学硕士学位论文论文题目：局部应用鼠神经生长因子对大鼠视神经的保护作用的研究答辩委员会主席：朱益华福建医科大学附属第一医院答辩委员会成员：廖洪斐南昌大学附属眼科医院宋宗明河南省立眼科医院论文答辩日期：2018年5月4号2温州医科大学硕士学位论文目录缩略词表．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

2、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4中文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5英文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7前言．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11实验结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

3、．．．．．．．．．．．．．．．．．19分析与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31参考文献．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32致谢．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

4、．．．．．．．．．．．．．．．．．．36参考文献．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42论文独创性声明．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．453温州医科大学硕士学位论文缩略词汇缩写英文全称中文全称mNGFmousenervegrowthfactor鼠神经生长因子RGCSretinalganglioncells视网膜神经节细胞PBSphosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲液FBSfetalbovineserum胎牛血清HEh

5、ematoxylin-eosin苏木精-伊红IgGimmunoglobulinG免疫球蛋白GTONTraumaticopticneuropathies外伤性视神经病变IFimmunofluorescence免疫荧光CT-BcholeratoxinB霍乱毒素B亚单位4温州医科大学硕士学位论文局部应用鼠神经生长因子对大鼠视神经的保护作用的研究中文摘要目的：研究表明，外伤性视神经病变（TON）中神经生长因子（NGF）传输受阻是导致视神经节细胞（RGCs）发生继发性凋亡的关键环节之一。发生TON后如何保护RGCs的功能或延缓RGCs的凋亡是轴突再生、视神经功能

6、重建的前置步骤。研究表明，视神经损伤周围微环境变化导致视神经轴索坏死，引发继发性RGCs凋亡。临床通过视神经解压术联合局部放置视神经营养药物治疗TON，但其改善视神经损伤处微环境及对视神经节细胞的保护作用尚未有文献报道。本研究利用大鼠视神经损伤模型，通过局部放置神经营养药物，考察大鼠外伤性视神经损伤后局部直接缓释给药对保护视网膜神经节细胞及促进轴突再生的作用。方法：1.分组与造模：采取显微镜下经结膜径路制作视神经钳夹伤模型，且在钳夹处沿轴突方向切开视神经鞘以模拟视神经减压术，动物模型分为两组，给药组和对照组。给药组：浸有10ul的mNGF的明胶海绵贴附

7、于视神经损伤处。对照组：浸有10ul生理盐水的明胶海绵贴附于视神经损伤处。两组分别于损伤造模后的第1天，第8天和第14天三个时间点进行观察。2.视网膜结构观察：给定时间点，处死动物，取眼球组织制作石蜡切片，行HE染色，光镜下在设置时间点定性观察视网膜各层结构和数量变化。3.视神经轴突结构观察：利用CT-B488顺行示踪技术观察造模后1天，8天，14天轴突细胞存活率。4.视网膜神经节细胞观察：用铺片免疫荧光染色方法观察造模后1天，8天，14天在距离视神经1/6和1/2处观察并统计RGCs细胞的存活率。结果：1.CTB顺行染色轴突结果示：给药组和对照组轴突

8、向损伤部位延伸和存活的数量并无明显差异2.RGC铺片结果示：各时间点随时间延长RGCs细胞明显