s.boulardii预防don诱导猪巨噬细胞凋亡的作用机理研究

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3、ｒ，分类号密级UDC学校代码10496硕士学位论文S.boulardii预防DON诱导猪巨噬细胞凋亡的作用机理研究MechanismofS.boulardiiPreventingDONInducedApoptosisofPorcineMacrophage论文作者王琨指导教师伍金娥副教授学科专业食品科学论文提交日期201506论文答辩日期20150601答辩委员会主席李德远评阅人2015年6月JlJT~i~l¥1fi~JFL~iJ(cpB~£11a,ij~lfflB"Jr*J~)'~,*itJC:If-a-11111JJt1t

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6、N），又称呕吐毒素，由镰刀菌属、葡萄穗霉属等真菌产生。虽然毒性较低，但因其稳定性高，并且在农作物如小麦、燕麦和大麦中广泛存在，从而得到更广泛的研究。国内外学者在DON诱导的免疫细胞毒性方面取得了一定的进展，但对于如何干预并降低这一毒素引发的慢性中毒仍然亟待解决。益生菌作为一种新型的免疫调节剂，在改善肠道营养，调节机体免疫方面发挥着重要作用。布拉迪酵母（Saccharomycescerevisiaeboulardii，S.boulardii）是唯一一种具有益生作用的酵母菌，对于生物毒素引发的腹泻有着良好的疗效。对于布拉迪酵母是否

7、具有对DON诱导的免疫细胞凋亡的干预作用以及可能存在的作用分子机理，并未见有文献报道。本研究旨在通过以猪肺泡巨噬细胞（PorcineAlveolarMacrophage，PAM）为免疫细胞模式株，将DON作用于PAM，诱导其产生细胞凋亡，在此细胞凋亡模型基础上，探究不同浓度的S.boulardii对DON损伤细胞的干预作用，并以两者作用的共同通路—p38MAPK通路为靶点，研究不同剂量S.boulardii对p38MAPK通路的下游炎性因子分泌以及p38蛋白表达的影响，进而阐明S.boulardii干预作用可能的分子机理。再者

8、为进一步探究酵母菌中是何种成分在发挥作用，因细胞壁为酵母菌与外界接触的直接感应点，本研究初步探讨了S.boulardii细胞壁对损伤细胞炎性因子mRNA表达量的影响。主要研究结果如下：1．通过MTT实验与Annexin-VFITC/PI双染法检测细胞凋亡的结果显示，DON毒素