vdr在绵羊睾丸、附睾内的表达及维生素d对绵羊附睾细胞的影响

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1、．，＾■ｒ叙车可巧网，产巧由－：分类号Ｓ８１４．８单位代码１０１１３学号２０１１１０３１－每边巧農素大聲全曰制博±学位论文ＶＤ民在绵羊睾丸、附睾内的表达及维生素Ｄ对绵羊附睾细胞的影响姓名：斬辉指导教师：岳文斌教授学科专业：动物遗传育种与繁殖培养单位：动物科技学院中国？山西？太谷二〇—五年六月Ｓｈａｎｘｉ乂ｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｕ－ｌｌｔｉｍｅＤｏｃｔｏｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇＥｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶＤＲｉｎＳｈｅｅＴｅｓｔｉｓａｎｄＥｉｄｉｄｍｉｓ＆

2、化ｅｐｐｐｙＥｆｆｅｃｔｏｆＶｉｔａｍｉｎＤｏｎＳｈｅｅＥｉｄｉｄｍｉｓＣｅｌｌｓｐｐｙＮａｍｅ：ＨｕｉＪｉｎＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．Ｗｅｎｂ虹ＹｕｅＭａｏｒ：ＡｎｉｍａｌＧｅｎｅ杜ｃＢｒｅｅｄｉｎ＆ＲｅｒｏｄｕｃｔｉｏｎｊｇｐＴｒａｉｎｉｎｇＵｎｉｔ：ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅＴａ－－ｉｕＳｈａｎｘｉＣｈｉｎａｇＪｕｎｅ２０１５，学位论文原创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文，是在导师指导下，独立进行研究工作所取得的成果。瞭文

3、中已注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文研究做出Ｖ乂明确方式标明过重要贡献的个人和集休，均良在文中。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。？作者签為（亲笔）：月曰＾〇皆年（学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定。即学位论文的知识产权属山西农业大学；同意学校保留并向国家有关、复印件和电子版允许论文被查阅和借部口或机构送交论文的原件；巧；本人授权山西农业大学可林将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可从采用影印、缩印或柱描等复制手段保存、汇编学位论文。

4、作者签或（亲笔）：年《月曰节辦《＾Ｉ导师签為（亲笔）：訓Ｊｒ年月日目录摘要１前胃２一第章文献综述３１维生素Ｄ研究概况３１．１维生素Ｄ研究历史３１３．２维生素Ｄ的代谢１．３维生素Ｄ需要量３１．４维生素Ｄ受体４１．５维生素Ｄ应答元件（ＶＤＲＥ）５２维生素Ｄ与生殖５２．１ＶＤＲ在雄性生殖器官内的表达５２．２ＶＤＲ与维生素Ｄ代谢相关基因与雄性动物生殖的关系８２．３维生素Ｄ缺乏与生殖能为９３维生素Ｄ代谢的调节及下游调节因子的推测１０４课题的提出及意义１１参考鋪１３第二章阿）度ｍＲＮＡ

5、及ＶＤＲ蛋白在睾丸、附睾内的表迭２０１材料方法２０１．１试验材料２０１丄１主要试剂２０１丄２主要仪器２１１．２试验方法２１１．２．１样品采集２１１．２．２引物设汁２２１．２．３总ＲＮＡ的提取２２１．２．４总ＲＮＡ内基因组ＤＮＡ的去除及ｃＤＮＡ合成２３１．２．５ＰＣＲ２３１．２．６胶回收２３１．２．７连接转化测序２４１．２．８序列比对２４１．２．９石蜡切片制作２４１．２．１０免疫组化２５１．２．１２标曲制作；２６２１－ｉｎ１．．３Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｇ２６４１．２．１数据

6、处理与统计方法２６２试验娜２７２．１阿ＷｍＲＮＡ在附睾头、体、尾、睾丸内的表达２７２．２？＾乂ｍＲＮＡ测序结果２７２．３阿ＷｍＲＮＡ序列比对结果巧２．４ＶＤＲ蛋白在绵羊睾丸内的定位３２２．５ＶＤＲ蛋白在绵羊附睾头内的定位巧２．６ＶＤＲ蛋白在绵羊附睾体内的定位３４２．７ＶＤＲ蛋白在绵羊附睾尾内的定位３５２．８附睾头、体、尾、睾丸内巧ＷｍＲＮＡ表达差异３６２．８．１目的基因与内参基因的溶解曲线％２．８．２目的基因与内参基因的标准曲线％２．８．３附睾头、体、尾、睾丸内ＶＤＲｍＫＮＡ表运差异３６２．９性成熟

7、前后附睾头、体、尾、睾丸内灼）ｉＪｍＲＮＡ表达差异３７２．１０附睾头、体、尾、睾丸内ＶＤＲ蛋白表达差异３８２．１１性成熟前后附華头、体、尾、睾丸内ＶＤＲ蛋白表达差异３９４１参考文献４３第Ｈ章维生素Ｄ对附睾细胞活力、增殖及调亡的影响４５１材料与方法４５１．１试验欄４５１丄１主要试剂４５１丄２主要仪器４５１．２试验方法４５１．２．１附睾