梨褐皮芽变果皮多胺代谢与相关基因克隆表达及pbll21-spms转化载体构建

《梨褐皮芽变果皮多胺代谢与相关基因克隆表达及pbll21-spms转化载体构建》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、Ｓ６６Ｉ．２１；０３６４：码分类号单位代２７２００Ｓ０密级；；学号１签傲乂參．’学位论文梨褐皮芽变果皮多胺代谢与相关基因克隆＂表达及ＰＢ－说ＭＳ转化载体构建１１２１Ｃｌｏｎｉｎ客ａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧｅｎｅｓＲｅｌａｔｅｄｔｏＰｏｌｙａｍｉｎｅｔＭｅｔａｂｏ化ｍｉｎＥｘｏｃａｒｏｆＲｕｓｓｅｔＳｋｉｎｅＭｕｔ；ａｎｔＰｅａｒ；＂ＩＳｐ（巧ｂｒｅｔｓｃｈｎｅｉｄｅｒｉＲｈｅｉｄ．ａｎｄＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＴｒａｎｓｅｎｉｃ

2、）ｇ＊ＶｅｃｔｏｒＢ－１１２１５ＰＭＳＰ研究生：孙虹丽指导教师；朱立武教授合作指导教师：申请学位口类级别：农学硕壬专业名称：果树学研究方向：果树种质獲源与生物巧术育种所在学院：园芝学院．答辩委员会主席：二〇—五年六月独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方夕ｈ论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用

3、过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。签学位论文作者签名：就妃居月字日期：如／Ｊ：年／月ｒ日本学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文件，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业大学可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，收录到《中国学位论文全文数据库》，可ｙＡ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，向社会公众提供信息服务。（

4、保密的学位论文在解密后适用本授权书）。＾＾学位论文作者签名；林化麻指导教师签名＇签＾字日期：年女月５日签字日期：切／；年女月１日学工位论文作者毕业后去向；通作单位：电话：信地址；邮编：摘要梨是一种营养丰富、深受人们喜爱的水果，其果皮色泽作为评价果实商品价值指标之一，向来极受关注。多胺作为一种重要的植物生长发育调节物质，参与植物生长发育的各个环节，并在植物抗逆性中也发挥着重要作用。为了探讨多胺在‘砀山酥梨’褐皮芽变品系‘锈酥’果皮褐色形成中的作用，试验以‘砀山酥梨’和‘锈酥’花后不同时期果

5、皮为试材，采用HPLC方法测定了两者果皮中多胺含量，运用RACE技术克隆出多胺合成过程中相关基因，利用Protparam网站对基因进行生物信息学分析、通过MEGA5.0软件分析基因蛋白系统进化，并通过Real-timePCR技术分析其在不同时期果皮中表达差异；同时构建了多胺合成过程中SPMS基因的表达载体。试验获得主要结果如下：(1)除花后50d和150d两个时期外，其它时期‘砀山酥梨’果皮中Put含量均显著高于‘锈酥’，花后不同时期‘砀山酥梨’和‘锈酥’果皮中Spd、Spm均呈现先增加后降低的趋势。花后75d时，‘锈酥’果皮中Spd和

6、Spm含量明显高于‘砀山酥梨’果皮中的含量；Put在花后初期较高，随后有个降低升高再降低的过程，在花后75d时‘砀山酥梨’果皮中Put含量要高于其在‘锈酥’果皮中的含量。(2)以‘锈酥’cDNA为模板，利用RACE技术获得ADC、ODC、SPDS、SPMS和SAMS基因核苷酸序列。ADC基因序列全长为2193bp，编码527个氨基酸，基因登录号为KM923903；ODC基因序列全长为1278bp的全长，编码305个氨基酸，基因登录号为KP144199；SPMS基因序列全长为1110bp，编码242个氨基酸，基因登录号为KM923906；

7、SPDS基因序列全长为909bp，编码221个氨基酸，基因登录号为KM923905；SAMS基因序列全长为1182bp，编码521个氨基酸，基因登录号为KM923904。预测了编码蛋白的理化性质，ADC、SPMS、SAMS三个蛋白均为水溶性蛋白。ADC、ODC、SPDS、SPMS和SAMS基因的预测蛋白与苹果的亲缘关系最近，同源性分别为91.9%、96.6%、97.3%、90.8%、94.6%。(3)ADC、SPDS、SPMS和ACL5基因在‘砀山酥梨’和‘锈酥’不同时期果皮中表达量结果表明，花后50d时，多胺合成中相关基因在‘锈酥’果

8、皮中表达量明显高于其在‘砀山酥梨’果皮中的表达量。ADC、SPDS和SPMS基因表达量均表现为先增加后降低的趋势，该结果与多胺含量变化趋势具有一致性，而ACL5基因变化和其它三个基因变化趋势不同，但在75d