棉胚珠离体培养优化及棕色素合成转运相关基因的表达

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1、１０３６４分类与；单化代码：密级：１２７２０４３７：号学在化＊义等学位论文棉胚珠离体培养优化及栋色素合成转运相关基因的表达Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｏｔｔｏｎｏｖｕｌｅｓｃｕｌｔｕｒｅｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｇｅｎｅｓｒｅｌａｔｉｖｅｔｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄ化ａｎｓｐｏｒｔｏｆｂｒｏｗｎｉｍｅｎｔｐｇ研究生：张雷指导教师；林毅－申请学位口类级别：理学硕止专业名称：牛物化学与分子生物学：分子生物学研究方向所在学院：

2、牛命科学学院答辩委员会主席：年月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导Ｆ进行的研巧工作及取得的研究成。，论文果尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明。与我确的说明并表示了谢意。ｏＭ：研究生签名：时间玉年《月＾曰关于论文使用授权的说明目本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允。许论文被查阅和借阅，巧レッ采用影印、

3、缩印或妇描等复制手段保存、汇编学位论文同意安徽农化大学可＾＾用不同方式在不同媒体上发表、＊传播学位论文的全部或部分内容。此协议）（保密的学位论文在解密后应遵守研究生签名；—时间：ｏｌＸ？护丰《月＾日４４￥一第导师签名：时间：年／月日本论文得到了以下科研项目的资助：1.安徽省生物学重点学科建设项目2.安徽省棉花产业体系3.安徽省教育厅重点项目（KJ2011A103，KJ2012A117）4.安徽省自然科学基金（KJ2014A078）摘要棕色棉属于陆地棉，因其纤维具有天然色彩，越来越受到人们的青睐，其颜色是色素在纤维中沉积的结果。因棕色棉棉纤维具有天然色彩，

4、在后续的纺织加工中无需印染，既节约了生产成本，又减少了对环境的污染，但是棕色棉存在棉纤维短、色素不稳定、色素分布不均匀、遗传不稳定等缺陷，严重制约了其生产与应用。本试验以棕彩选1号和泗棉3号为材料，优化棉胚珠离体培养体系，研究离体条件下棉胚珠纤维发育过程中生理生化变化、关键酶基因的表达量变化，探讨离体条件下棕色棉色素合成、积累的规律。主要结果如下：1.棉胚珠离体培养的优化条件：花后1天的胚珠成活率较高；适宜消毒方式为75%的乙醇10min+0.1%氯化汞5min；棉胚珠离体培养的适宜的激素配比为GA31.0µmol·L-1+IAA1.0µmol·L-1+ZR1.0µmol·L-1。2.

5、白棉胚珠鲜重和纤维长度均大于棕色棉；棕色棉离体培养胚珠纤维均被DMACA染成蓝色，且染色较深，而白棉胚珠纤维染色较浅，明显低于棕棉。3.在胚珠纤维的发育过程中，棕色棉胚珠纤维中总黄酮、原花青素、儿茶素的含量均高于白棉，均呈先升高后降低的趋势：棕棉纤维中总黄酮含量在20DAC达到峰值；棕棉纤维中可溶性原花色素与不可溶性原花色素含量在20DAC达到峰值；棕棉纤维中儿茶素的含量在20DAC达到峰值。4.胚珠纤维发育过程中色素合成关键酶基因（GhCHS、GhF3H、GhDFR、GhANS、GhANR）在棕棉纤维中的表达量要明显高于白棉，在10DAC时表达量最高，之后都呈现下降趋势；棕棉纤维中G

6、hTT12基因在25DAC时表达量急剧升高，达到极显著水平。5.与暗处理相比，15DAC，光处理显著性抑制了基因ANS、ANR、DFR、CHS、F3H、TT12的表达；20DAC，光处理抑制了基因ANS、ANR、DFR、CHS、F3H的表达，但促进了TT12基因的表达。关键词：棕色棉，胚珠，离体培养，合成酶基因，RT-PCRIAbstractBrowncottonwhosefiberhasnaturalcolorbelongstouplandcotton,thecoloristheresultofpigmentdeposition.Browncottoncansaveproductio

7、ncostsandreduceenvironmentalpollutioninthesubsequentprocessingprintingbecauseofitsfiberhasnaturalcolor.Butthedefectsofshortlint,unstablepigmentation,unevenpigmentationandgeneticinstabilityrestricteitsproductionandapplication