番茄灰霉生防菌的筛选、鉴定及生防机制研究

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1、：８４３２．４单位代码：１０３６４分类与１２７２０Ｑ４１：：密级学号学位论文番茄灰霉生防菌的筛选、鉴定及生防机制研究ＳｃｒｅｅｎｉｎＩｄｅ凸杜ｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＢｉｏｃｏ田化〇１ＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＡｎｔａｏｎｉｓｔｇ，ｇａｇａｉｎｓｔＢｏｔｒｙｔｉｓＣｉｎｅｒｅａｆｒｏｍＴｏｍａｔｏ研究生：杨利敏指导教师：李森副教授合作指导教师：邱德义研究员申请学位口类级别：农学硕±专业名称：棺物病理学研究方向：梢物病害牛物防治所在学院：棺物保护挙院答辩委员

2、会主席二零一五年六月独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢盾０、学位论文作者签名：若１知辱、签字日期；年＾月口日含／学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规允许定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印

3、件和电子文件，或论文被查阅巧借阅。本人授权安徽农业大学可ｙＡ将学位论义的全部部分内容编入有关数据库进行检索，收录到《中国学位论文全文数据库会》，可１：＾采用影巧、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，向社学仿公众论提义供信息作者豁名服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）。签；＾糸指导教师签名；字日期：年６月日签字日期：年月曰学工位论文作者毕业后去向；通作单位：电话：信地址：巧Ｐ编；：DissertationfortheDegreeofMasterScreening,IdentificationandBioco

4、ntrolMechanismofAntaganismagainstBotrytisCinereafromTomatoMasterCandidate:YangLiminSupervisor:AssociateProf.LiMiaoProf.QiuDewenAnhuiAgriculturalUniversityHefei,Anhui,ChinaJune,2015中文摘要灰霉菌（Botrytiscinerea）侵染包括重要的粮食作物、经济作物和园艺作物等200多种作物物种，对温带和亚热带地区产生了重要的影响，在全球范围内造成严重的经济损失。枯草芽孢杆菌由于生长快、营养要求简单，

5、并且产生的芽孢耐热抗逆性极强，在病害防治上有其突出的优势，有利于生防菌剂的生产、剂型的加工，同时该菌在环境中容易存活、定殖与繁殖这种特性使得生防菌剂的防效事半功倍。本文比较系统详尽地研究了不同浓度梯度的的枯草芽孢杆菌CQ48h发酵滤液处理对灰霉菌菌丝生长发育、分生孢子生长萌发和分生孢子致病性的抑制效果，从细胞生理学、生物化学等水平探讨了CQ抑制灰霉菌生长发育和降低致病性的可能机制，主要结果如下：1.通过筛选获得了两株高活性菌株Nc6和CQ，可以抑制病原真菌B.cinerea的生长。由于CQ表现出更稳定的抗病效果，此后的实验中以CQ作为主要的实验对象。通过16srDNA序列

6、比对，确定了高活性菌株CQ属于枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis。CQ发酵滤液对灰霉菌B.cinerea菌丝的生长及形态、孢子的生成量、孢子的萌发和芽管伸长、生长量都有不同程度的抑制作用;洋葱表皮侵染实验表明，经过CQ发酵滤液处理后，番茄灰霉菌孢子侵染进程受到影响其中，发酵滤液浓度越高，抑制作用越明显。温度和pH对生防菌CQ的活性有一定影响，其活性成分耐受一定的高温，但是超过100℃高温时，活性大大降低；有一定的耐酸碱性，经过强酸强碱处理仍有部分活性，其中活性成分最适pH在7左右。2生防菌株CQ发酵滤液在番茄离体叶片上和温室番茄植株上，均表现出了较好的防治效果。

7、生防菌株CQ发酵滤液以及激活蛋白普绿通和阿泰灵处理对番茄植株中的抗病酶类POD和PAL活性的影响与对照组相比，都有显著的提高。而实验表明CQ活性成分为其胞外分泌物，经硫酸铵沉淀、蛋白质纯化仪以及层析液相分离仪器对其进行初步提取并纯化，其产物对番茄灰霉菌有抑制作用。3．通过对CQ发酵条件的探索，明确了在LB液体培养基基础上添加10g/L的可溶性淀粉，及0.01g/LVB2、Arg、Pro等，作为其发酵培养基最为合适；CQ发酵最适温度为28～30℃,最适pH在7附近；由于CQ发酵过程中对氧含量的需求，相同容积的锥形瓶，应尽量装取较