表达pcv2 orf2基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的构建及其免疫保护效力研究

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1、分类每Ｓ８巧？份学号屋置纖—爲请泉違义參硕主学位论文表达ＰＣＶ２０ＲＦ２基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的构建及其免疫保护效力研究张挺杰指导教师姜平教授专业名称预防兽医学研究方向动物传染病诊断与免疫答辩日期二〇—五年五月＊■：，－■－ｉ．－．．．．Ｊ－＇，■ＩＩＩ．ＣＯＮＳＴＲＵＣＴＩＯＮＡＮＤＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥＩＭＭＵＮＯＧＥＮＩＣＩＴＹＯＦＡＲＥＣＯＭＢＩＮＡＮＴＰＲＲＳＶＥＸＰＲＥＳＳＩＮＧＯＲＦ２

2、ＯＦＰＯＲＣＩＮＥＣＩＲＣＯＶＩＲＵＳＴＹＰＥ２ＢｙＺｈａｎＴｉｎｊｉｅｇｇＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｆｂｒｔｈｅＭａｓ化ｒＤｅｒｅｅｏｆＡｒｏｎｏｍｇｇｙＣｏｍｐｌｅｔｅｄｉｎＡｐｒｉｌ，２０１５ＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔｉｎＭａ２０１５ｙ，原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在

3、导师的指导下，独立进行研巧工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名：名１击４＾＾＾（＾丰《月曰ｆ学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部

4、或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。＂保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密ｄｊ／＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名：去以７化年月日多仪＾、＼／导师（需亲笔）签名年６月曰Ｉ口录目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ上篇文献综述一第章猪巧殖与呼吸综合征病毒研究进展１１１病原学１１．病毒基因組结构２１２病毒编．码蛋白３２免機７２．１体液免疫应答７２．２细胞

5、免疫应答７３疫ＩＩ８３１．传统常规疫苗８３．２新型疫苗１０４反向遗传学技术在ＰＲＲＳＶ研究中的巧用１２４因功能研究１３．１病毒基４．２病毒致病机理研究１４４３病毒载体研究１４．４１．４新型标Ｉｄ疫苗研究５１参考文献７下篇研究内容第二章表达猪圆环病毒２型ＯＲＴ２基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的构建与鉴ｇ２７１材料与方法２８２８１．１材料－－Ｔ１．２ＰＲＲＳＶＴＪＭ的２專株全长ｃＤＮＡ克隆质粒ｐＣＭＶＪＭ的构雄２８１－．３

6、感染性ｃＤＮＡ克隆质粒ＭＶＴＪＭ／ＴＲＳ的构述４ｐＣ３１表达ＰＣＶ２ＯＲＦ２基因的重纪猪巧殖与呼吸综合征病毒的构建及其免疫保护效力研究－１．４感染性ｃＤＮＡ克隆质粒ｐＣＭＶＴＪＭ／Ｃａｐ的构建％１３７．５病毒姪救与鉴定１．６病毒生长曲线４１１４２．７病毒空斑试验１４２．８病毒稳定性鉴定２鱗４４－－２ｃＣＭＶＴＪＭ的４４．１ＰＲＲＳＶＴＪＭＦ９２毒株全长ＤＮＡ克隆质粒ｐ构建－２ｃＭＶ．４６．２感染性ＤＮＡ克隆质粒ｐＣＴＪＭ／ＴＲＳ的构建．ｃ－／Ｃａ

7、２ＭＶ４８．３感染性ＤＮＡ克隆质粒ｐＣＴＪＭｐ的构建２５０．４质粒转染及病毒捶救２．５姪救病毒的鉴定５０２．６捶救病毒的生长曲线５２２孔．７病毒空斑试验２．８病毒稳定性鉴定巧３ｉｔｉ＆５３参考文献５５第Ｈ章表运ＰＣＶ２ＯＲＦ２基因的重组ＰＲＲＳＶ对ＰＣＶ２的免疫保护效力巧１材料与方法５９１．１材料５９１６０．２疫苗制备１．３猪体免疫保护试验６０１－４ＰＲＲＳＶＥＬ投Ａ抗体６１１６１．５ＰＣＶ２ＥＬＩＳＡ．抗体

8、检测１．６ＰＣＶ２中和试验６１１６２．７淋己细胞増殖试验ｅａｌ－ｔｉｍｅ１６．８ＲＰＣＲＰＣＶ２３检测１．９病理学观察６４１６４．１０免疫组化１．１１数据统计分析６４２结果６４２．１免疫试验结果６４２．２ＰＣＶ２攻毒试验结果的３７０