超富集植物商陆抗锰内生菌的筛选鉴定及其特性的研究

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2、々＞ａｃ从０Ｓ０卢文显＇遽．鱗策；学科专化生勸化学与分子生物学，研究方向：集物巧术与环境隹复指导教师；：李巧教巧申请学位麵：理学硕壬；迭！，论文提交日期：２０巧年月日、／论文评阅人：论文答辩日期：＿巡巧生■．，，見＿＿日ｍ答辩委员会主席：々学位授予单位：福建师范大学日期：２０巧年月曰Ｍ．学位巧予—＇＊－ｆ＇柳方‘－．－濟長夸誇鲁；；２０１５年５月；技二．着＜＾．；叙乙－－瑪蒙若－：：義瞧物：诗拳结袁％‘、．．．古：：；Ｖ；古非心东Ｖ蘇，，

3、、，Ｖ鴻屋；Ｋ心Ｉ摘要中文摘要随着工农业生产的发展与人民生活水平的提高，环境中污染物的种类和数量不断增加。，主要包括重金属污染和有机物污染重金属污染问题是环境污染防治的重一点内容之。近年来，关于重金属污染的报道屡见不鲜，由此引发的环境问题和社会问题备受关注。为彻底解决重金属污染问题，单纯依靠物理或化学方法难达到彻底治理的目的与要求。近年來，微生物修复、植物修复、动物修复等生物修复技术得到了快速一二发展，这在定程度上弥补了物理和化学法成本高、治理不彻底、容易造成次污染等缺陷。基于此，国内外众多研究人员建

4、立了具有更强、更广、更快等特点的生物修复技术。其中，通过重金属超富集植物对污染场地进行原位修复是比较理想的一有种措施。许多研究发现微生物与植物关系密切。微生物的作用主要体现在能有效提高植物抵抗重金属毒性并提高对重金属的去除效率Ｐｈ一。商陆（ｙｔｏｌａｃｃａａｃｉｎｏｓａ）是作为种猛超积累植物，，其抗猛内生菌多样性及其与植物互作效应未得到充分的研究。因此本研究旨在探究商陆可培养内生菌的多样性及其抗猛与除铺特性。本实验得出Ｗ下结论：１从儘超积累植物商陆根、茎和叶中筛得１９株可培养抗儘内生菌。通过１６ＳｒＲＮＡ测

5、序与序列比对确定了它们的种属关系，并构建了系统进化树。其中，根和茎中的．内生菌各跨越了４个属，叶中只有１个种属。芽抱巧菌是这Ｈ个部位共同的优势种群。同时，，，本文对这些抗猛内生菌的促植物生长能力进行测定结果显示各个部位的抗儘内生菌都具有分泌植物激素嘲噪玄酸ＩＡＡ）。（的特性２根据种属分类Ｗ及除儘能力的测定－－－－，从中挑选出４株（Ｇ１、Ｇ６、Ｊ９和Ｊ１１）一、作进步探究，主要包括革兰氏染色分析扫描电镜观察、半固体穿插培养及生化特性分析。一比较３为进步评估这４株菌的耐儘能力，进行了耐猛能力的。实验结果表明，－－－Ｇ１

6、Ｇ６６００ｍＬ浓度的二价儘离子而未出－和能耐受ｇ／现生长抑制现象，而Ｊ９和Ｊ１１在二价猛离子浓度高达４００ｍｇ－１－／Ｌ时，生长明显受到抑制。此外，Ｇ和Ｇ６都来自－力与±壤中长期重金属污染的耐性适应有关。Ｇ１和商陆根部，说明微生物耐猛能Ｉ福建师范大学卢文显硕±学位论文Ｇ－６具有很强的耐猛能力。，故选作后续的研究对象－１－６为４筛得的Ｇ和Ｇ商陆植物内生菌中抗儘和除绩能力最强的两个菌株。因此，对这两个菌株进行生长特性的研究及除猛体系的优化。设置不同的理化因素条Ｇ－１－６的生长及－二酸件对和Ｇ除铺能力进行了考察。结

7、果表明，菌株Ｇ１在下销或‘Ｈ＝葡萄糖为碳源，ｐ７，实验湿度为３０Ｃ，转速为１５０ｒｐｍ和接种量为３％时，其生－ｍ长及除儘能力最强。而菌巧Ｇ６在了二酸错或葡萄糖为碳源，转速为１５０ｉｐ、接’＝种量为５％，ｐＨ７和湿度为３０Ｃ的条件下，其生长及除儘能力最强。－ａｎｅｓｅ－ｒｓ５课题组前期筛得的抗儘细菌０５（ｍａｎｅｉｓｔａｎｔｅｎｄｏｈｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ）４ｇｐｙＧ－１为对照。，，研究了添加对商陆除猛能力的影响结果表明在无菌条件下（１／２ＭＳ。培养基），外源细茵的添加虽不会抑制商陆萌发，但显著影响其生长不

8、同的是，在±培条件下，二者都促进了商陆的生长与儘富集。Ｗ上结论说明，抗钮细菌在１／２ＭＳ，但王壤中可利用态的养分较少培养基中会