抗稻瘟病水稻内生放线菌的筛选鉴定及生物活性的研究

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1、学校代号：10532学密号：S11221011级：湖南大学硕士学位论文抗稻瘟病水稻内生放线菌的筛选鉴定及生物活性的研究诠窒筌燮旦塑；2Q!垒生三旦2里旦Screening，IdentificationandCharacterizationofRiceEndophyticActinomycetesagainstthePathogenofRiceBlastbyYANGXiaoLUB．E．(HunanUniVersity)2011AthesissubmittedinpartialsatisfactionoftherequirementsforthedegreeofMasterofscience1

2、nBiochemistryandmolecularbiologyintheGraduatesch001ofHunanUniversitySupervisorProfessorZHUYongHuaMay,20142湖南大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：弃b咳概日期：w口年6月7日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校

3、有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1、保密口，在年解密后适用本授权书。2、不保密d。(请在以上相应方框内打”√”)作者签名：导师签名：彬咳．潞之p辫f日期：汐／够年石月7日日期：厶，u年6月岁曰抗稻瘟病水稻内生放线菌的筛选鉴定及生物活性的研究摘要水稻稻瘟病是世界上传播最为广泛且危害最大的水稻疾病之一，但由于稻瘟病病原菌具有遗传复杂、致病多样和极易变异等特点，使得水稻抗病品种

4、及化学农药经常在数年内失效，因此稻瘟病的生物防治日益受到重视。内生菌是是植物微生态系统的重要组成部分，它能够在植物体内存活而不对寄主植物具有明显危害。内生放线菌可产生丰富多样的生物活性物质，发挥促进植物生长、抗逆境、抗病虫害等作用。因此，内生放线菌作为一种天然防治稻瘟病的潜在资源值得开发利用。本论文为了寻找新的防治稻瘟病的生物防治菌，从湖南本地生长的水稻中筛选具有抗稻瘟病潜力的内生放线菌并开展相关性能研究。．1．选取了稻瘟病易感品种籼稻湘矮早7号和相应的具有广谱抗稻瘟性的谷梅4号为研究材料。在水稻生长至2周、4周、7周、11周、16周、19周左右时，对未感和已感稻瘟病的湘矮早7号、谷梅4号

5、的水稻材料进行了内生菌分离。2012年水稻分离结果显示，处于营养生长期的水稻中分离的内生菌数量明显比并进期、生殖生长期水稻内生菌数量多；未感水稻中分离的内生菌比已感水稻分离的多，其中从2周、4周未感水稻中分离的233株内生菌占全部时期分离总量的55％。2．选取2012年4周水稻材料中分离的171株内生菌进行抗稻瘟病菌的筛选实验，结果得到5株较好拮抗菌Sh．1、Sh．2、Sh．3、Sh．4、Sh．5，都来自未感病水稻。利用5种不同生理小种的稻瘟病菌进行复筛，发现菌Sh．2的各项拮抗能力最突出。菌株在280C、PDA培养基培养条件下能有效抑制稻瘟病菌的生长；在ISPII液体培养基中，280C、

6、150r／min转速震荡培养7天的菌液，在混合有稻瘟病菌孢子的PDA培养基中有明显的抑制稻瘟病生长的抑菌圈出现；鉴定其属于链霉菌属(Streptomyces)中的吸水链霉菌(hygroscopicus)，命名为OsiSh．2。3．针对OsiSh．2拮抗稻瘟病能力，对其产生的生物活性物质做了进一步研究。发现OsiSh．2能够分泌起降解真菌细胞壁作用的几丁质酶、纤维素酶及能对真菌产生铁元素竞争性抑制的铁载体；在加入色氨酸的液体培养基中最高能产生132mg／L浓度的植物生长素吲哚乙酸，对植物生长起促进作用。该菌的水稻回接结果证明该菌能重新定殖水稻。上述特点表明其在生物防治水稻稻瘟病、开发新药物等

7、方面具有较大的开发潜力。关键字：稻瘟病；拮抗；水稻内生放线菌；生物活性物质；II硕士学位论文AbstractRiceblastISoneofthemostwide。spreadandseverediseasesintheworld．ThediversityofpathogenicityandfrequentmutationcausedbytheperplexinggeneticfeaturesofMagnaportheg