靶向dna聚合酶的人工microrna用于肝癌基因治疗的研究

《靶向dna聚合酶的人工microrna用于肝癌基因治疗的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号院校代码８８１０又名皆健巧Ｉ絶硕壬学位论文鞭向ＤＮＡ聚合酶的人工ｍｉｃｒｏＲＮＡ用于肝癌基因治疗的研究学位申请人；刘吴学科专业：劳动卫生与环境卫生学指导教师：贾振宇研究员２０］５．０５答辩日期；Ａｄｉｓｓｅｒｔａ村ｏｎｓｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＺｈｅｉａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆｊｇＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ化ｒ化ｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｇＤＮＡＰｏｌｍｅｒａｓｅｓａｓ化ｒｅｔｓｆｏｒＧｅｎｅＴｈｅｒａｏｆｙｇｐｙＨｅａｔｏｃｔｅＣａｒｃｉｎｏｍａｐｙＣａｎｄｉｄａｔｅ

2、：ＨａｏＬｉｕＭａｏｒ；Ｏｃｃｕａ村ｏｎａｌａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＨｅａｌｔｈｊｐＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＺｈｅｎｙｕＪｉａＺｈｅｉａｎＡｃａｄｅｍｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓｊｇｙＨａｎｇｚｈｏｕ３１００１３，Ｐ．Ｒ．ＣｈｉｎａＭａ，２０１５ｙ独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明

3、一。本人完全意识到本人将承担本声明引起的切法律后果。学位论文作者签名：日期：年：ｒ月／Ｔ日学位论文版巧使用授权书本学位论文作者完全了解有关保留、使用学位论文的规定：，即浙江省医学科学院有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，义许论文被查阅和借飼。本人授权浙江省医学科学院可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据＾、库进行检索，可心采用影印缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本论文属于／不保密２］。＂＂（请在上方框内打Ｖ）、学位论文作者签名：：ｉ采指导教师签名ｌ日期Ｗ

4、（年《月＞：年月日日期：５日＞１７ｆ目录中文摘要１ＡＢＳＴＲＡＣＴ２前胃３材料与方法６结果与分析６６讨论与建议９０ｉｔｉｔ９４参考文献９５综述及参考文献９８附件１（攻读学位期间发表的论文及参加的学术会议目录）１１５浙江省医学科学院硕壬学位论文中文摘要一目的：肝细胞肝癌（ｈｅａｔｏｃｅｌｌｕａｒｃａｒｃｉｎｏｍａＨＣＣ是致死率很高的恶性肿瘤之，目ｐ，）前。的治疗手段效果有限新兴的基因治疗给肿瘤患者带来了新的希望，可Ｗ通过组织特异性启动子调控导入细胞的治疗性基因祀向表达，。然而肝癌基因治疗的

5、祀点多集中于肝癌发生发展过程中的相关基因，只能对相应类型的肿瘤起效。在本研究中，我们选择ＤＮＡ复制环节这一所有细胞増殖的关键步骤作为治疗祀点，来抑制肿瘤细胞生长。－ｒｏ方法：本课题构建了包含ＨＣＣ特异性甲胎蛋白ａｆｅｔｏｔｅｉｎＡＦＰ增强子的重组ＡＦＰ（ｐ，）启动子调控串联连接的分别祀向ＤＮＡ聚合酶（Ｘ，８，￡的人工ｍｉｃｒｏＲＮＡ和重组活化Ｃａｓｅ３ＡＦＰ－Ｃａ－ＡＦＰ－ａｍＰｓｐａ基因的重组腺病毒Ａｄ／ｓｐｉ民，同时构建仅有重组ＡＦ启动子的重组腺病毒Ａｄ／ＡＦＰ作为空白病毒对照。结果：体外实验：重组腺病毒ＷＭＯＩ５０感染ＡＦＰ强阳性的Ｈ

6、ＣＣ细胞ＨｅｐＧ２、ＡＦＰ－ｅ３Ｂ７７０２／－ａｓ－ａｍ弱阳性的ＨＣＣ细胞Ｈｐ和ＡＦＰ阴性的正常肝细胞ＨＬ，ＡｄＡＦＰＣｐＡＦＰｉＲ能够抑制ＨｅｐＧ２和Ｈｅｐ３ＢＤＮＡ聚合酶（Ｘ，５，８的表达，阻滞细胞周期在Ｇ１期；诱－ｅＧ２和Ｈｅ３ＢＣａｓ－ＡＦＰ－ａ发Ｈｐｐ细胞调亡、抑制细胞増殖。Ａｄ／ＡＦＰｐｍｉ艮对肝癌细胞的－Ｃａｓ－ＡＦＰ－ａｍ抑制效应与ＡＦＰ的表达水平正相关。Ａｄ／ＡＦＰｐｉＲ对正常肝细胞ＨＬ７７０２－－－ＡＦＰ没有作用。体肉实验；建立裸鼠Ｈｅｐ３Ｂ移植瘤模型，瘤内注射Ａｄ／ＡＦＰＣａｓｐａｍｉＲ，未能观察到明显的抑瘤效应，但能够诱发细胞

7、调亡。－ｄ／ＡＦＰＣａｓ－ＡＦＰ－ａｍ化有望成为新的肝癌基因治疗药物结化Ａｐ，通过ＡＦＰ启动子特异性抑制ＡＦＰ阳性的肝癌细胞ＤＮＡ聚合酶ａ，５，￡表达，阻遏肝癌细胞生长，诱发一一肝癌细胞调亡。这方法基于抑制细胞增殖的关键步骤ＤＮＡ复制，不局限于某种基因异常表达的ＨＣＣ，为肝癌的基因治疗提供了新的思路。１浙江省医学科学院硕壬学位论义ＡＢＳＴＲＡＣＴＢａｃｋｒｏｕｎｄ：ＨｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａＨＣＣｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏ巧