高糖对大鼠心肌成纤维细胞尾加压素ⅱ及其受体蛋白表达的影响

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1、分类号：R542.2+3密级：不保密UDC：616学校代码：11065硕士学位论文高糖对大鼠心肌成纤维细胞尾加压素II及其受体蛋白表达的影响张捷指导教师蔡尚郎教授学科专业名称心内科论文答辩日期2015-5-30高糖对大鼠心肌成纤维细胞尾加压素II及其受体蛋白表达的影响摘要目的研究高糖对大鼠心肌成纤维细胞尾加压素II（UII）及其受体（UT）表达的影响，为进一步研究UII系统在糖尿病心肌病中的作用提供实验基础。方法在无菌条件下取新生1-3天龄Wistar大鼠的心肌成纤维细胞，体外培养并传代。待第三代心肌成纤维细胞生长密度为70%时,随机分为正常对照组、高渗对照组

2、、高糖处理组。三组细胞分别用含5.5mmol/L葡萄糖、5.5mmol/L葡萄糖+19.5mmol/L甘露醇、25.0mmol/L葡萄糖的培养基孵育48h，然后应用免疫荧光法、免疫印迹法检测各组细胞中UII及UT蛋白量的表达。结果通过免疫荧光法和Westernblot法可见高糖刺激可使心肌成纤维细胞中UII及其受体UT表达增加，高糖处理组UII和UT表达量明显高于正常对照组和高渗对照组（F=15.08～192.2，q=3.751～30.00，P<0.05）。结论大鼠心肌成纤维细胞中存在UII及UT表达,高糖刺激心肌成纤维细胞可使UII及UT表达增强，提示UII

3、系统可能参与了糖尿病时心肌纤维化过程，为进一步的研究提供实验基础。关键词：尾加压素II；糖尿病性心肌病；心肌成纤维细胞；心肌纤维化EFFCTSOFHIGHGLUCOSEONTHEPROTEINEXPRESSIONOFUROTENSINIIANDITSRECEPTORINCARDIACFIBROBLASTSAbstractObjectiveToexploretheeffectsofhighglucoseontheexpressionsofurotensinII(UII)anditsreceptor(UT)incardiacfibroblasts，toprovid

4、eanexperimentalbasisforfurtherstudyoftheroleofUIIsystemindiabeticcardiomyopathy.MethodsThecardiacfibroblastsofaged1-3daysoldneonatalWistarratswereobtained,culturedandpassagedinvitroundersterileconditions.Whenthethird-generationcardiacfibroblastswereculturedfor80%cellgrowthdensitysho

5、uldbeevenlyrandomizedtothreegroups:normalcontrol,hypertoniccontrolandhighglucose.Thethreegroupsofcellswereculturedwithglucose5.5mmol/L、glucose5.5mmol/L+mannitol19.5mmol/Landglucose25.0mmol/Lfor48hrespectively.ImmumofluorescenceandWesternblottingwereusedtodetecttheexpressionofUIIandU

6、T.ResultsImmumofluorescenceandWesternblottinganalysisshowedthattheexpressionsofUIIandUTproteinweresignificantlyincreasedinhighglucosegroupascomparedwithnormalcontrolandhypertoniccontrol（F=15.08～192.2，q=3.751～30.00，P<0.05）.ConclusionWefoundthatUIIandUTproteinwasexpressedinratcardiacf

7、ibroblastsandtheexpressionofUIIandUTcanbestimulatedbyhighglucose,whichsuggestUIIsystemmaybeinvolvedintheprocessofdiabetesmyocardialfibrosisandprovidesabasisforfurtherexperiments.Keywords:urotensinII；diabeticcardiomyopathy；myocardialfibrosis；cardiacfibroblasts目录引言····················

8、···················