副猪嗜血杆菌和猪支气管败血波氏杆菌双重pcr检测方法的建立及应用

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4、：ａｔｉｏｎＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄａｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｄｕｌｅｘＰＣＲａｓｓａ化ｒｐｐｐｙｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＨａｅｍｏｈｉｌｕｓａｒａｓｕｉｓａｎｄＢｏｒｄｅｔｅｌｌａｐｐｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａＢ：ｉｎＪｕａｎｕａｎｙＱｊＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙ：Ｐｒｏｆ．ＺｈｕＬｉｎｇＭａｏｒ：Ｍ过ｓｔｅｒｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｊｙＣｈｅｎｄｕＳｉｃｈｕａｎｇＭａ２０１５ｙ，论文独倒性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作

5、所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研巧成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料一。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。Ｓ，研究生签名：滿Ｗ年反月７曰單趨关于论文使用援枚的黄明、本人完全了解四川农业大学有关保留使用学位论文的规定，即；学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文

6、。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＂＂（请在上□内划Ｖ）研究生签名：＾从６年６月０日＾导师签名：＞０任年＾月日．中文摘要副猪嗜血巧菌（ＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｐａｒａｓｕｉｓＨｓ）和猪支气管败血波氏杆菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ，ｐｂｒｏｎｃｈｉｓｅｔｉｃＯＢｂ是引起猪发生呼吸道综合征ＰＲＤＣ的重要致病因子。机体在各种应激ｐｊ）（）因素的影响下或感染导致免疫力下降的病毒性疾病时，均易导致Ｈｐｓ和Ｂｂ的感染率大、大増加

7、。这两种病原菌混合感染情况十分普遍，且都易引起猜呼吸道隐性感染及急慢性炎症，临床症状相似不易区分，给临床诊断和防治带来困难。本研巧依据ＨｐｓＯＭＰＰ２一基因和ＢｂＤＮＴ基因成功建立了种快速、简便、精准和灵敏的可同时检测具有毒力的副猪嗜血杆菌和猪支气管败血波巧杆菌的诊断方法。通过试验证实，建立的双重ＰＣＲ法特异性强，并成功应用于临床实践。，敏感性高，重复性好１．巧重ＰＣＲ方法的建立依据Ｈｐｓ０ＭＰＰ２和郎ＤＮＴ基因序列各设计１对引物，并对引物进行二聚体、同源巧、互补性分析，试验预计分别能扩增出７４８ｂｐ和３４４ｂｐ

8、的ＤＮＡ片段。利用设汁的引物分别对ＨＯＭＰ前ＤＮＴ基因进行ＰＣＲ一一ｐｓＰ２基因和扩増，并在单ＰＣＲ基础上进步优化