电离辐射对小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞作用的基因表达谱研究

《电离辐射对小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞作用的基因表达谱研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、SOOCHOWUNIVERSITY匕(立论文_G_论文题目电讨/丨、鼠小肠M丰:±皮纟田胞和固有层纤维细胞作用的基因表达谱研究研究生姓名李霞玲指导教师姓名许玉杰专业名称临床医学（放射医学）研究方向分子核医学2015年5月论文提交日期苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。

2、本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：系錢日期：苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在年—月解密后

3、适用本规定。非涉密论文&Z论文作者签名：激必曰期：导师签名：&期：电离辐射对小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞作用的基因表达谱研究中文摘要中文摘要研究背景：早前在研究C60(OH)24-SLN-E的对小鼠辐射防护作用研究时，发现经过6Gy60Co射线照后21天的小鼠小肠固有层细胞中的γ-H2AXfoci数量远多于小肠绒毛上皮细胞，这一现象提示两种细胞在DNA修复能力上存在差异。目的：探索小肠绒毛上皮细胞和固有层细胞在DNA损伤修复能力产生差异的分子机制，寻找治疗肠型放射病的关键靶分子。方法：（1）小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞在体

4、外进行原代培养和传代。再将每种细胞各分为两组，实验组细胞经过6GyX线照射并修复6小时；对照组不照射。（2）细胞照射后6小时，用westernblot检测分析γ-H2AX的蛋白表达水平。（3）细胞照射后6小时，提取每个样品的总RNA，合成标记探针cDNA并与基因芯片进行杂交，通过芯片扫描获得基因表达数据并进行差异基因筛选，进一步对差异基因进行GO分析和PATHWAY分析。结果：（1）成功培养并获得原代小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞。（2）X射线照射并修复6小时后，小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞的γ-H2AX蛋白表达量都上升，但两者之

5、间没有显著的差别。（3）在参与DSB非同源末端连接和同源重组修复的基因表达中，两种细胞有9个基因存在表达差异，包括POLM、XRCC5、FEN1、XRCC2、POLD3、POLD2、EME1、RAD54B和BRCA2基因，且在小肠绒毛上皮细胞的表达都显著高于固有层纤维细胞。照射后6小时，固有层纤维细胞中RAD54B表达明显下调；除上述9个基因存在差异表达外，RAD51和RPA2也有差异表达，同样在小肠绒毛上皮细胞的表达都显著高于固有层纤维细胞。除此之外，受照后的两种细胞中，参与细胞凋亡和细胞周期调控的部分基因也有表达差异。结论：本课题成功获

6、得了原代培养的小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞并用于基因表达差异的研究。研究发现，由于参与DNA非同源末端连接和同源重组修复相关蛋白明显高表达，受照小鼠小肠绒毛上皮细胞DNA双链断裂修复能力明显强于固有层纤维细胞，其中RAD54B基因的下调表达可能在受照小肠固有层纤维细胞DNA双链断裂修复延迟方面发挥重要作用。I电离辐射对小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞作用的基因表达谱研究中文摘要关键词：小肠绒毛上皮细胞；小肠固有层纤维细胞；原代培养；DNA损伤修复；基因芯片。作者：李霞玲指导教师：许玉杰II电离辐射对小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤

7、维细胞作用的基因表达谱研究英文摘要TheradiationeffectonthegeneexpressionspectrumofIECsandintestinallaminapropriafibroblastsofmouseAbstractBackground:InthepreviousstudyofC60(OH)24-SLN-Eforradiationpreotectioninmice,ithasbeenfoundthattheγ-H2AXfociinintestinallaminapropriaweremorethanthatinint

8、estinalvillusepithelialcellsatthe21thdayafter6Gy60Corayexposure.Theexperimentalphenomena