载gdnf基因的骨髓间充质干细胞促周围神经再生的实验研究

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1、分巧号号ＭＺ１２５３８学ＵＤＣ密级辕叫义聲ｉＹＡＮＧＺＨＯＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＩ硕壬学化冷文（专业型）载ＧＤＮＦ基因的骨髓间充质干细胞促周围神经再生的实验研究尚修超；江苏扬州顾加祥副教，２２５００１指导教师姓名：＾受，扬州大学，申请学位级别：硕壬学科专业名称；骨科手足论文提么口期：２０１５年４月论文答辩口期：２０１５年５月２０学位授予单位：扬州大学学位授予口期：１５年６月答辩委卫民．巧会主席：范教授２０１５年５月尚

2、修超载ＧＤＮＦ基因的骨髓间充质干细胞促周围神经再生的实验研究１＿载ＧＤＮＦ基因的骨髓间充质干细胞促周围神经再生的实验研巧中文摘要（）目的；探讨骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ）经胶质细胞源性神经营养因子ＧＤＮＦ复合绿色巧光蛋白ＧＦ。（巧定向诱导向神经细胞分化及其促进大鼠外周损伤神经的再生；应用骨髓间充质干细胞的贴壁特性复合连续换液法获取原代细胞方法，培养获取纯度一及活力较高、形态较为统的第Ｈ代细胞，第Ｈ代骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ）经载ＧＤＮＦ＞基因复合绿色英光蛋白（ＧＨ）的质粒

3、脂质体为介导转染诱导分化，记录对比细胞活力及形态学方面的变化，通过免疫巧光鉴定神经元特异性締醇化酶（ＮＳ巧的英光表达确定转染一结果。错夹法统建立坐骨神经损伤模型，将诱导培养后形态学较为音好的细胞浓缩后植入周围神经再生室橫型（ＳＦＩ）、完整解剖实验大，术后定期观察统计坐骨神经功能指数鼠双侧雕肠肌称重，测量视肌肉湿质量率、损伤神经再生室段解剖出神经组织行自动病理图文系统分析神经再生纤维、视化肉冰冻切片行ＤＡＰＩ染色观察细胞萎缩、核凝聚状态及形态学变化。、神经损伤再生室组织取材电镜观察神

4、经显微结构变化结果：实验结果证实骨髓间充质干细跑经胶质细胞源性神经营养因子转染诱导分化组相关数据均较未经诱导对照组显著，这充分肯定了ＧＤＮＦ基因的确切作用，经胶质细胞源性神经营养因子转染的骨髓间充质干细胞生长活跃分化良好，神经元特异性帰醇化酶．ＮＳ，，神经营养因子转染诱导狙坐骨神经扫描电镜下超微结构再生更加明显（巧特异表达细胞核染色可见实验组能明显抑制報肌肉的萎缩。结论；骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ）经胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）复合绿色巧光蛋白（ＧＦ巧诱导后可向神经细胞分化

5、，特异表达神经细胞相关表面碌志。定向诱导分化后的细胞注入大鼠坐骨神经损伤模型可较对照组明显改善坐骨神经相关指数。关键词；骨髓间充质干细胞；胶质细胞源性神经营养因子ｒ周围神经；再生；扬州大学硕±学位论文２＿ＴｈｅＥｘｅｒｉｍｅｎｔａｌＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＭｅｓｅｎｃｈｍａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓｐｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙＧＤＮＦＧｅｎｅＰｒｏｍｏｔｅＰｅｒｉｈｅｒａｌＮｅｒｖｅＲｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｐｇＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｅｃｔｉｖｅ：

6、ＴｏｅｘｌｏｒｅｔｈｅｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓＢＭＳＣｓｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｔｏｊｐｙ（）ｕｒａ－ｎｅｌｃｅｌｌｓｂｒｅｅｎｆｌｕｏｉｒｅｓｃｅｎｔｒｃＨｅｉｎＧＦ。ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉ化ＵａｌｃｅｌｌＵｎｅｄｅｒｉｖｅｄｙｇｐ（ｇ’ｎｅｕｒｏｔｒｏｈｉｃｆａｃｔｏｒＧＤＮＦｅｎｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｂｙｌｉｏｓｏｍｅａｎｄ１：ｏｒｏｍｏｔｅｅｒｉｈｅｒａｌｎｅｒｖｅｐ（）ｇｐｐｐｐｒｅｇｅｎｅｒａ

7、ｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＥｘａｎｓｉｏｎｒａｔｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓＩｎｖｉｔｒｏｓｅｌｅｃｔｔｈｅｔｈｉｒｄｐｙ，ｅｎｅｒａｔ－ｉｏ打ｏｆｃｅｌｌｓＵｓｅｒｅｅ打ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｒｏｔｅｉ打ＧＦＰｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅｄｅｒｉｖｅｄｇ，ｇｐ（）ｇｎｅｕｒｏｔｒｏｈｉｃｆａｃｔｏｒＧＤＮＦｅ打ｅ：〇ｃｅｅｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｓｔｅ！ｉ打ｄｕｔｈｂｏｎｈｙｍａｌｍ

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