毛果杨ptrdreb28转录因子功能的研究

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1、学校代码:10225学号:S15730学化冷文'--毛果杨戶公转录因子功能的硏究陈韵琳指导教师姓名:李成浩教授东北林业大学申请学位级别;硕±学科专业:林木遗传育种论文提交日期:2015年4月论文答辩日期:2015年6月户授予学位单位;2015年6月;东北林业大学授予学位日期答辩委员会主席;.二论文评拥人-"^:共.'.封/-―:--'?--????.-,'‘,>v.V'...v'.。‘....、..’.—.'.

2、...r.門A、',..二UniversitCode:10225yRegisterCode:SI5730DissertationfortheDereeofMastergFunctionRe化archof戶In戶trichocarpaCandida化:YunlinChenSupervisor:Prof.ChenghaoLiAcademicDereeAliedfor:ForestrSchoolgppySpecialit:Fore巧TreeGe

3、neticandBreedinygDa化ofOralExamina村on:June,2015Universit;NortheastForestrUniversityyy摘要摘要一毛果杨转录因子中发现了个公化郎亚族巧r公义郎如基因,通过其表达研究发现其可能与植物逆境胁迫及次生壁的形成有关。首先对毛果杨公义閒亚族进行了生物信息学分析。鉴定出毛果杨公化卽亚族75个基因:。访?£及亚族基因进行基于序列的系统发生树的研究,分析得出饼及亚族可分为A-1-6到A六个亚群。公亚族基因进行了染色体

4、定位,结果得出毛果杨公乂£及家族串联复制和并列复制占毛果杨公及友公亚族蛋白编码基因的56%(42/75)。公义故亚族基因进行了基因结构分析,其,毛果杨饼?£公亚族基因结构保守,除个别基因存在内含子外余基因都没有内含子结构。公化郎亚族基因进行了motif分析,在基因我们得研究中,一--motif3为目折叠1,motif1指2和3,motif2为a螺旋,他存在于每个毛,P折叠果杨饼?£及亚族成员中。0化邸亚族基因进行了EST电子表达分析,结果表明有16个基因有较高的转录表达累积次数。公义郎亚族基因在

5、成熟的叶、嫩叶、根、节间和茎节进行了基因芯片表达分析,成熟的叶片中戶/^饼化及^、75、33、满53为上调表?>达嫩叶中化。义郎/3、27、2S、57和獻为上调表达节间户矿饼?正公20、50、如、;;70和74为上调表达;茎节处P/rDi化B2S、73和74为上调表达;根中巧rD化E公7、如和7S为上调表达。公化拙亚族基因中挑选15个基因进行非生物胁迫分析,除巧公扣基因没有表达外,其余基因均有上调表达,结果显示这些基因能够被逆境胁迫诱导表达。'如做-?£方2《进斤克,358巧?。加公化饼戶其次,本实验选取隆

6、构建载体,利用基因枪技术瞬时转化洋葱表皮进行亚细胞定位,结果显示戶fr公化郎2S基因定位在细胞核中。公胃2S基因启动子克隆及顺式作用元件分析,结果识别9个顺式作用元件,其--boxox4TCT-moifBoxIIIBoxWl为中A、B、t原件为光调控元件、为蛋白结合位点、--motif-真菌调控元件、Skn1为脏乳特异性表达启动子、CCGTCCbox为分生组织特异性-box和TATA-box为核也启动子元件激活元件、CAAT。再次,构建巧化巧£公23基因过表达和抑制表达载体,遗传转化大青杨,获得过表达转基因

7、株系15个株系和抑制表达转基因株系2个株系。’C-最后,过表达转基因大青杨和野生型大青杨在424h,42C化的非生物胁迫条件下,MDA含量较低。,野生型叶片受损程度较大,转基因株系POD和SOD活性较强BOmMNac一l胁迫个月,转基因株系有侧枝萌生但野生型植株则没有,转基因株系根系发育良好。转基因株系可降低木质部发育程度,可加深皮层、木质部和髓细胞壁的纤维素染色。trDREB28关键词毛果杨;抗逆性化;P;大青杨;遗传转--IAbstractAbstractInthisstudy,

8、尸化。及£公2(?transcriptio打fac1;orwasfoundin化anscrip化medatabase戶Wc片oc口;?幻whichbelonstoDREBtranscrition

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