猪胸膜肺炎放线杆菌(app)感染小鼠模型的建立及黏附素adh的生物信息学分析

猪胸膜肺炎放线杆菌(app)感染小鼠模型的建立及黏附素adh的生物信息学分析

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时间:2019-03-14

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1、上海交通大学硕士学位论文猪胸膜肺炎放线杆菌(App)感染小鼠模型的建立及黏附素Adh的生物信息学分析硕士研究生:刘雨潇学号:1121509083导师:崔立(教授)申请学位:农业推广硕士学科:养殖所在单位:农业与生物学院答辩日期:2015年1月授予学位单位:上海交通大学DissertationSubmittedtoShanghaiJiaoTongUniversityfortheDegreeofMasterTheestablishmentoftheexperimentalanimalmodelbyActinobacilluspleuropneumoniaeanda

2、nalysisoftheproteinAdhgenomeCandidate:YuxiaoLiuStudentID:1121509083Supervisor:Prof.LiCuiAcademicDegreeAppliedfor:MasterofagriculturalextensionSpeciality:BreedingAffiliation:SchoolofAgricultureandBiologyDateofDefence:Jan,2015Degree-Conferring-Institution:ShanghaiJiaoTongUniversity上海交

3、通大学硕士毕业论文上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文《猪胸膜肺炎放线杆菌(App)感染小鼠模型的建立及黏附素Adh的生物信息学分析》,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:日期:年月日i上海交通大学硕士毕业论文上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向

4、国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密□。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名:指导教师签名:日期:年月日日期:年月日ii上海交通大学硕士毕业论文猪胸膜肺炎放线杆菌(App)感染小鼠模型的建立及黏附素Adh的生物信息学分析摘要猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,App)是引起猪传染性胸膜肺炎疾病的首要

5、病原菌,在世界范围内广泛传播,是严重危害养猪业的传染病病原之一。我国流行的猪传染性胸膜炎主要由胸膜肺炎放线杆菌血清型1型、3型、5型、7型引起。目前,针对该菌株所建立的动物模型,多为药物评价模型,缺乏系统的实验动物感染模型。本研究选用SPF级的昆明小鼠作为实验动物,分别建立App-S1型、App-S7型实验动物感染模型,在小鼠上成功复制出胸膜肺炎的经典病例,并针对两种血清型的菌株分别进行药敏实验,运用生物信息学方法对自转运黏附素的结构和功能分析。本论文的研究研究内容和成果主要如下:一、App-S1小鼠感染模型的建立针对我国流行菌株App-S1,选用SPF级的昆

6、明小鼠作为建模动物,试验证明该菌株对昆明小鼠有强致病性,其半数致死量LD50为4.48×iii上海交通大学硕士毕业论文5.8510cfu。从组织病理学结果显示,感染小鼠呈现肺脏、脾脏、和肾脏多器官组织的炎症变化,伴有较为严重的出血现象,具有典型的肺炎及胸膜炎症状。结果显示,App-S1型菌对小鼠有较强的毒力,有极强的致病性及致死性。本实验成功人工模拟胸膜肺炎放线杆菌1型菌株的感染小鼠模型。二、App-S7小鼠感染模型的建立针对流行菌株App-S7,选用SPF级的昆明小鼠作为建模动物,验证App-S7对昆明小鼠具的致病性。组织病理学观察结果显示,感染小鼠不具有典

7、型的肺炎及胸膜炎等症状,临床观察中也没有明显的临床特征,无死亡现象。结果表明,App-S7型菌株为弱毒株,毒力较弱且对于实验动物昆明小鼠不具有致病性。三、App-S1和App-S7交叉保护试验选择毒力较强的1型菌株和毒力较弱的7型菌株进行交叉免疫保护试验研究。先用App-S7型菌株制备抗原,分别采用活菌免疫和灭活菌免疫,对小鼠进行免疫,经检测产生抗体后,用10倍LD50剂量的App-S1菌对小鼠攻毒,计算其保护效率,验证1型菌株与7型菌株之间是否存在有交叉保护。结果表明,接种7型菌的活菌免疫抗原及灭活菌免疫抗原的小鼠均对1型菌有免疫保护,保护率分别为80%和6

8、0%,二者之间存在交叉保护作用,活菌免

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