甘草黄酮及皂苷类成分谱效关系研究

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1、分类号：R9单位代码：10752密级：公开学号：201200149宁夏医科大学硕士研究生学位论文甘草黄酮及皂苷类成分谱效关系研究Researchonthespectrum-effectrelationshipbetweenthetotalflavoniodsandtotalsaponinsfromRadixglycyrrhizae学位申请人：马玲指导教师：付雪艳教授申请学位门类级别：医学专业名称：生药学研究方向：中药药效物质基础所在学院：药学院论文完成日期：二〇一五年三月宁夏医科大学研究生院NingxiaMedicalUniversityThe

2、sisforApplicationofMaster’sDegreeResearchonthespectrum-effectrelationshipbetweenthetotalflavoniodsandtotalsaponinsfromRadixglycyrrhizaeStudent’sName:MaLingSupervisor:Prof.FuXueyanSubjectCategory:MedicalScienceMajor:PharmacognosySpecialty:ChineseHerbPharmacodynamicSchool:Coll

3、egeofPharmacyCompletionDate:Mar.201523宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要甘草黄酮及皂苷类成分谱效关系研究摘要目的采用大孔吸附树脂联合聚酰胺柱层析技术富集甘草黄酮及皂苷类成分，并结合HPLC法建立不同产地甘草黄酮及皂苷类成分指纹图谱，利用灰色关联分析法对甘草黄酮及皂苷类成分进行谱效关系研究，确定甘草黄酮各色谱峰代表的化学成分信息与镇咳作用的关联程度及甘草皂苷各色谱峰代表的化学信息与镇咳、保肝作用的关联程度，最终确定可能与药效相关的有效成分，为甘草药材质量控制提升提供规律性的科学依据，也为其广泛栽培及种植提

4、供一定的实验数据。方法1.通过大孔吸附树脂联合聚酰胺柱层析技术分别对新疆、内蒙等十个不同产地甘草黄酮及皂苷类成分进行富集，得到10个不同产地甘草药材的黄酮、皂苷类成分富集部位。2.HPLC/DAD法建立10个不同产地甘草黄酮及皂苷类成分指纹图谱，运用“中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件”进行甘草黄酮及皂苷类成分指纹图谱相似度评价。3.富集部位药效学研究：(1)采用氨水引咳法进行实验研究，通过记录咳嗽潜伏期和2min内咳嗽次数来评价甘草黄酮及皂苷类成分的镇咳作用；(2)采用四氯化碳致小鼠肝损伤实验，测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸

5、氨基转移酶(AST)的酶活力来综合评价甘草皂苷类成分的保肝作用。4.运用灰色关联分析法研究甘草黄酮及皂苷类成分的指纹图谱特征峰所代表的化学成分信息与镇咳及保肝药效的关系，最终根据关联度大小来确定指纹图谱特征峰所代表的化学成分对其药效作用的贡献程度。结果1.10个不同产地的甘草药材经AB-8大孔吸附树脂及聚酰胺柱层析技术富集后得到甘草黄酮类成分浸膏，它们分别为宁夏固原市原州区7.20g、新疆11.60g、宁夏吴忠I宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要市红寺堡区8.40g、甘肃8.20g、宁夏盐池县发电站10.90g、甘肃省庆阳市4.80g、宁夏

6、盐池县药材基地7.00g、陕西绥德县12.00g、内蒙8.20g、宁夏石嘴山市6.80g；浸膏得率分别是3.60%、5.80%、4.20%、4.10%、5.45%、2.40%、3.50%、6.60%、4.10%、3.40%；10个不同产地的甘草药材经D101大孔吸附树脂富集得到甘草皂苷类成分浸膏，它们分别为宁夏吴忠市红寺堡区7.50g、陕西绥德县8.80g、宁夏隆德县7.50g、新疆6.20g、甘肃省庆阳市6.80g、内蒙7.20g、宁夏石嘴山市5.00g、宁夏固原市原州区6.80g、宁夏盐池县6.30g、宁夏市售（具体产地不详）5.40g；浸

7、膏得率分别是15.00%、17.60%、15.00%、12.40%、13.60%、14.40%、10.00%、13.60%、12.60%、10.80%。2.建立了10个不同产地甘草黄酮及皂苷类成分的指纹图谱，通过“中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件”对甘草黄酮及皂苷类成分指纹图谱进行相似度评价，确定了甘草黄酮指纹图谱中的11个共有峰，其保留时间在11.550min的是芹糖甘草苷；保留时间在12.919min的是甘草苷；保留时间在34.837min的是芹糖异甘草苷；保留时间在44.512min的是甘草素；保留时间在80.844min的是异甘草素；

8、确定了甘草皂苷指纹图谱中的13个共有峰，其保留时间在37.355min的是甘草酸；保留时间在74.370min的是甘草次酸。3.氨水引咳实验中，与空白