电离辐射对原代海马神经元nfatc43信号通路作用的研究

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1、SOOCHOWUNIVERSITY论文题目电离辐射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路作用的研究研究生姓名何如杨晓舂指导教师姓名直专业名称影像医学与核医学研究方向放射生物学论文提交日期2015年3月苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其他教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个体和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。.>曰IV论文作者签名：AA^学位论文使用授权声明本人完全

2、r解苏州人学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社）、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文「本学位论文属在年—一月解密后适用本规定非涉密论文=]日期：7/61(“•)X日期：>ltui电离辐射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路作用的研究中文摘要电离辐

3、射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路作用的研究中文摘要第一部分：探讨电离辐射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路的作用目的：前期实验表明电离辐射对神经突起的生长具有抑制作用，而NFATc4/3信号通路对于神经元突起生长、突触形成、神经元存活都具有重要作用，因此，我们研究电离辐射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路的作用。方法：运用MTT法检测电离辐射对离体原代海马神经元死亡的影响；利用Q-PCR（QuantitativeReal-timePCR，实时荧光定量PCR）分析在基因水平神经元BDNF的变化情况；运用Western-Blot法检测在蛋白水平NFATc4/3、磷酸化NF

4、ATc4/3（P-NFATc4/3）、糖原合成激酶-3β（Glycogensynthesiskinase-3β，GSK-3β）、钙调磷酸酶的变化情况。结果：MTT实验结果显示，在照射后第1天和第3天，随着剂量的增加，原代海马神经元死亡增多，差异有统计学意义（第1天和第3天，P<0.0001），但4Gy、8Gy、10Gy、12Gy组间差异无统计学意义（第1天，P=0.5188；第3天，P=0.3428），即表明超过一定的剂量后，电离辐射对原代海马神经元的死亡不具有剂量依赖性。Q-PCR结果显示，海马神经元在经过照射后的第1天和第3天，随着剂量的增大，BDNF在mRNA水平上的表达逐渐降低，差

5、异有统计学意义（单因素方差分析，第1天，P<0.0001；第3天，P=0.001）。WesternBlot结果显示，海马神经元在经过照射后的第1天和第3天，随着剂量的增大，去磷酸化的NFATc4/3逐渐减少，差异有统计学意义（单因素方差分析，第1天，P=0.033；第3天，P=0.015）。而磷酸化NFATc4/3（P-NFATc4/3），随着剂量的增大，P-NFATc4/3逐渐增加，差异有统计学意义，（单因素方差分析，第1天，P=0.035；第3天，P=0.022）。但是GSK-3β与钙调磷酸酶，无论是照射后第1天还是照射后第3天，差异均无统计学意义（单因素方差分析，第1天，GSK-3β

6、，P=0.997；钙调磷酸酶，P=0.913；第3天，GSK-3β，P=0.996；钙调磷酸酶，P=0.923）。I中文摘要电离辐射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路的作用结论：电离辐射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路有抑制作用。【关键词】电离辐射；海马神经元；NFATc4/3；信号通路第二部分：BDNF和环孢素A调控电离辐射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路的作用目的：利用脑源性神经营养因子（brainderivedneurotrophicfactor，BDNF）和环孢素A（CyclosporineA，CsA）调控电离辐射对原代海马神经元NFATc4/3信号通路的影响

7、。方法：利用Q-PCR（QuantitativeReal-timePCR，实时荧光定量PCR）分析原代海马神经元在分别经过BDNF、CsA共培养处理后，BDNF在mRNA水平上的变化情况；运用Western-Blot法检测在经过BDNF、CsA共培养处理后，原代海马神经元在蛋白水平上NFATc4/3、P-NFATc4/3、糖原合成激酶-3β（GSK-3β）、钙调磷酸酶的变化情况。结果：Q-PCR结果显示，海马神经元经过照