赞皇大枣黑腐病病原菌的鉴定及致病机理研究

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1、曲义爭ＳｈａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ２０１５届硕±学位论文赞窒大夢黑腐病病原菌的鉴定疫致病机理妍究作者姓名褚建梅指导教师局芬副教校為＇学科专业微生物学研究方向微生物生理生化培养单位生物技术研究所学习年限２０１２年９月至２０１５年５月ｍｉｌｌ受＾ｓ４ｔｍｒｎｒｎｍ＾ｍｍｌ二０＿五年五月Ｗ＿ＩＩ山西大学２０１５届硕±学位论文赞皇大参黑腐病病原菌的鉴定及致病机遵研巧作者姓名：褚建梅指导教师：高芬副教授学科专

2、业：微生物学硏究方向：微生物生理生化培养单位：生物技术研究所学习年限：２０１２年９月至２０１５年５月二〇—五年五月Ｍ’Ｔｈｅｓｉｓｉｓｆｏｒａｓｔｅｒｓｄｅｒｅｅ，ＳｈａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔ，２０１５ｇｙＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＰａｔｈｏｅｎｅｓｉｓｏｆｔｈｅＰａｔｈｏｅｎＣａｕｓｉｎｇｇｇＢ－ｕｕｂｅｌａｃｋｒｏｔＤｉｓｅａｓｅｏｎＺａｎｈｕａｎｇｊｊＮａｍｅＪ－ｉａｎｍｅｉＣｈｕＳｕｅｒｖｉｓｏｒＡｓｓｏ

3、ｃｉａｔｅＰｒｏｆ．ＦｅｎＧａｏｐＭａｏｒＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏＳｅｃｉａｌｔＭｉｃｒｏｂｉａｌｊｇｙｐｙＳｐｃｉａｌｔｙＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏＤ巧ａｒｔｍｅｎｔｇｙｒｃｒａｔ－ＲｅｓｅａｈＤｕｉｏｎ２０１２．９２０１５．５Ｍａｙ，２０１５目录中文摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ一第胃绪论１１．１安黑腐病的研究概述１１丄１麥黑腐病的分布与危害１１

4、丄２麥黑腐病的发病症状与命名１１丄３娶黑腐病病原菌的研巧现状１１．２植物病原真茵致病机理的研究２１．２．１概述２１．２．２病原真菌的致病因子２１．２．３病原真菌侵染对植物膜透性的影响３１．２．４病原真菌侵染对活性氧清除酶系统的影响４１．２．５病原菌侵染对植物防御酶系统的影响４１．２．６果实类病害致病机理的研究概况５１．３本课题的研究意义及主要内容５第二章寶皇大麥黑腐病优势病原菌的鉴定７２．１供试材料７２．２．实验方法７

5、２．２．１病原菌的分离纯化与致病性测定７２．２．２病原菌的形态学鉴定７２．７．２３病原菌的分子鉴定２．３结果与分析８２－－．３．１ＺＨＢＳＸ２０１３的形态学鉴定８２－－．３．２ＺＤＪＳＸ２０１３的鉴定结果９２．４讨论１１第云章錢皇大専黑腐巧茵细胞壁降解酶活性的研究１３３丄供试材料１３３．２活体外病原菌角质酶和细胞壁降解酶的诱导培养１３３．２．１菌株的活化１３、３．２．２果胶酶纤维素酶和角质酶诱导培养和提取１３３．３罹

6、病组织细胞壁降解酶的提取１３３．３．１健康娶果的病原菌接种与取样１３３．３．２酶的提取１４３．４酶活力测定１４３．４．１角质酶（Ｃｕｔｉｎａ化）活力的测定１４３．４．２ＤＮＡ比色法测Ｉ定聚簽甲基纤维素酶（Ｃｘ）、甲基半乳糖酪酸酶（ＰＭＧ）、多聚半孔糖酸酸酶（ＰＧ）酶活性１４３．４．３多聚半乳糖醇酸反式消除酶（ＰＧＴＥ）和果胶甲基反式消除酶（ＰＭＴＴＥ）的定１５３．５数据分析１５３．６结果与分析１５３．６．１标准曲线的制作１５３．６

7、．２活体外乂化ｍ／妃如产生的角质酶（Ｃｕｔｉｎａｓｅ）及细胞壁降解酶（ＣＷＤＥｓ）活性变化１６３．６．３乂化》？加沁的侵染果实后罹病组织角质酶（〇１也１〇８６）的变化１７３．６．４乂化ｍ／紅侵染果实后罹病组织细胞壁降解酶（ＣＷＤＥｓ）的变化．１７３．６．５，如ｗｅｒａ化在活体夕护生的角质酶（Ｃｕｔｉｎａｓｅ）及细胞壁降解酶（ＣＷＤＥｓ）活性变化１８３．６．６Ｐ／ｏｗｅｒａ化侵染果实后罹病组织角质酶（Ｃｕｔｉｎａｓｅ）的变化１９ｇ３．６．７知０／？６＾的侵染果

8、实患病组织细胞壁降解酶（ＣＷＤＥｓ）的变化．．．．．２０３．７讨论２１第四章费皇大麥黑腐巧菌侵染对寒果细胞膜的影响２２４．１试验材料２２４．２试验方法２２４．２．１菌株的活化与接种处理２２４．２．２细胞膜渗透率的测定２２４．２．３丙二酵（ＭＤＡ）含量的测定２２４．２．４脂氧合酶ＬＯＸ活性的测定２３（）４．３数据分析２３４．４结果与分析２３２４４．４．１细胞膜渗透率的测定４．４．２丙二醒（ＭＤＡ）含量的变化２４