大鼠心肺复苏后脑occludin蛋白表达及其对血脑屏障作用的影响

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1、分类号：密级：UDC：学号：406521812539南昌大学医学院硕士研究生学位论文大鼠心肺复苏后脑Occludin蛋白表达及其对血脑屏障作用的影响TheexpressionofOccludinproteinanditsinfluenceinblood-brainbarrieraftercardiopulmonaryresuscitationinrats李爱莲培养单位（院、系）：南昌大学第一附属医院指导教师姓名、职称：张慧利教授申请学位的学科门类：医学学科专业名称：急诊医学论文答辩日期：2015年5月答辩委员会主席：评阅人：2015年5月学位论文独创性声明

2、本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内

3、容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：探讨心肺复苏后大鼠脑Occludin

4、蛋白的表达及其对血脑屏障作用的影响方法：将200只SD雄性大鼠随机分为两组：A组（对照组，n=100），仅进行相应的麻醉和动静脉插管及气管插管，未行窒息及CPR,再将A组分成A1组(50只)和A2组（50只）。B组（复苏组，n=100），制作复苏模型，常规小动物心肺复苏，自主循环恢复后再将B组分成B1组（50只）和B2组（50只）。监测A组术后、B组ROSC后60min内MAP的变化；A1组术后稳定10分钟后在2h、6h、12h、24h、48h,B1组自主循环恢复后在2h、6h、12h、24h、48h断头处死大鼠取脑组织，各时间点10只,应用western

5、blot、免疫组织化学染色法检测脑组织HIF-1a、VEGF、Occludin的表达，干湿重法测脑组织含水量。A2组术后稳定10分钟后2h、6h、12h、24h、48h,B2组自主循环恢复后2h、6h、12h、24h、48h，在相应时间点前2h经大鼠尾静脉按3mg/kg标注注射20g/L伊文氏蓝，在相应时间点断头处死大鼠取脑组织,各时间点10只，用荧光分光光度计计算出血脑屏障对EB的通透率。实验数据采用SPSS17.0软件进行统计处理。所有计量资料用均数±标准差（x±s)表示，并进行正态性及方差齐性检验，两样本间比较采用t检验，多样本间比较用单因素方差分析

6、，以P<0.05为差异具有统计学意义。结果：①各组基础状态下R、W、HR及MAP的变化，差异无统计学意义（P>0.05）。②B1组在ROSC后2h脑HIF-1a蛋白表达开始增高，6h增高明显，12h达到高峰，24h逐渐降低，48h仍高于正常，与A1组比较有显著差异（P<0.05或P<0.01）；③B1组在ROSC后2h脑VEGF蛋白表达开始增高，6h增高明显，12h达到高峰，24h逐渐降低，48h仍高于正常，与A1组比较有显著差异（P<0.05或P<0.01）；④B1组在ROSC后2h脑Occludin蛋白开始降低，6h降低明显，12h达低峰，24h逐渐上

7、升，48h仍低于正常，与A1组比较有显著差异（P<0.05或P<0.01）。⑤B1组在ROSC后2h脑组织含水量开始增加，6h增加明显，12h达到高峰，24h逐渐降低，48h仍高于正常，与A1组比较有显著差异（P<0.05或P<0.01）。II摘要⑥B2组脑组织EB含量在ROSC后2h开始增加，6h增加明显，12h达到高峰，24h逐渐降低，48h仍高于正常，与A2组比较有显著差异（P<0.05或P<0.01）。结论：1、脑组织中HIF-1a、VEGF蛋白表达在ROSC后各时间点均高于对照组，而Occludin蛋白表达均低于对照组。Occludin蛋白表达随

8、着HIF-1a、VEGF蛋白表达增高而呈下降趋势。2、脑组织EB及