石蜡组织切片法-毕业论文

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1、毕业论文石蜡组织切片法摘要；石蜡切片（paraffinsection）是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日，但标本可以长期保存使用，为永久性显微玻片标本。关键词：石蜡组织切片、制作法引言石蜡组织切片制作广泛应用形态学实验教学用片及医院病

2、理检查切片制作过程中，而在制作石蜡组织切片标本，必须把握制作中的每个环节。石蜡组织切片广泛应用于形态学实验教学及活组织病理检查中。随着现代科技的发展，人们对疾病的诊断和治疗越早越好，即“早发现,早诊断、早治疗、早预防”。而形态学（如组织胚胎学，病理学）研究的是人体在正常或异常情况下的微细结构，要更好的掌握这些镜下结构，只有多看组织切片。由此可见，组织切片在形态学实验教学及外活组织病理检查中的重要性[1,2]。石蜡组织切片在制作使相当繁琐，是一项技术要求很严格的工作。具体过程如下：取材→固定→冲洗→脱水→包埋→切片→烤片→脱蜡→染色→脱水→透明→封片等一

3、系列过程。石蜡切片一直是组织学，病理组织学和法医病理学等生物医学的最基本和最普通形态学检验技术[3]。1制片过程1.1取材取材作为石蜡组织切片制作的第一道步骤，对将来成片的结果起着举足轻重的作用。取材的好坏直接关系到石蜡组织切片质量的好坏。-13-毕业论文在制作形态学石蜡组织切片时，有的制作者往往有一个错误的概念，即必须将取材对象规定为人体各器官组织，其实这是不正确的。主要是因为人体取材比较麻烦，人体比较匮乏，其他哺乳动物（如家兔、猪、羊等）有与人体共同的特点，也就是哺乳动物的共同特点：即全身有体毛，以乳汁哺育后代，体腔被膈分为上胸下腹，有左右对称的身

4、体等。而且有的哺乳动物组织器官的结构比人体的还要典型，比如说猪肝小叶的组织结构比人肝小叶的组织结构更典型，猪肝小叶分界清晰，肛门管区内的小叶间动脉，小叶间胆管结构清楚，分界更清晰，比人肝小叶肛门管区的结构更典型[4]。所以在使用正常形态学实验教学时选用一些其他动物的切片进行教学，效果会更好，学生接受起来更容易，当然在病理活组织检查及异常人体组切片观察时要除外。在制作形态学组织切片时，有的制作者往往对取材的时间不予重视，这样容易影响切片效果。取材一定要新鲜，即迅速宰杀的动物的相应部位（如肝脏、胃、血管等）提取组织，如果动物死亡时间过长，脏器的细胞构成，蛋

5、白就会变性坏死，这样制作的组织切片效果就不好。同样，在外科手术切除脏器做病检时，也应迅速在患者的切除部位提取组织，经处理后制作成切片，如果过一段时间后再取材制片，就会使病检工作加大难度，从而影响疾病诊断的结果。取材部位一定要选合适，比如说在制作肾实质时，所选部位一定由外向内，而不应在里面选一部分，如果只选里面部分，做出来的切片效果就不能反映肾脏的被摸—皮质—髓质的结构；再如在做临床活组织病理检查制片时，假如医生给一位患者做胃镜检查时，怀疑患有胃癌，那么医生必须要在怀疑病变的部位取一些活组织制成石蜡切片进行检查，而不是随随便便在该患者胃部的任何一个部位取

6、一些活组织来制片，否则制出的切片就没有任何代表性，对疾病的诊断也没有意义。有些制做者在取材后往往会忽略取材后的问题，比如说有的制作者已下班或有其他事情，往往会把取材标本闲置一旁，而没有马上放到固定试剂中予以固定。这样一来，取材标本里的蛋白就会变性，细胞成分也会发生改变，制作出来的切片往往会发生改变。正确的方式是取材后应马上将标本放入4％的多聚甲醛中予以固定12～24小时，然后再进行处理。另外有的器官在取材后应予以冲洗，比如有的沾有尘土和杂物，有的出血比较严重，应冲洗干净，否则就会影响制片效果。-13-毕业论文由上几点不难看出，取材对形态学石蜡组织切片制

7、作的重要性，把握好取材这一关，就会使切片制作有一个良好的开端。俗话说：良好的开端就是成功的一半。如果制作者在制作切片取材时作好以上四点，使取材这一关得到保证，就一定会制作出高质量的形态学石蜡组织切片。1.2固定组织切片的固定剂主要为甲醛和酒精，固定剂可与蛋白质交联结合，使之变性，组织硬化，结构固定，此外其本身的变性物质可与染料结合，增强着色能力。同时，固定交联和沉淀蛋白质、脂肪、糖、酶等细胞内物质成分，产生不同的折光率，使得光学显微镜下易于更清晰地观察组织细胞的微细结构。在诸多影响切片质量的因素中，尤以固定较为重要。减少或去除组织切片中甲醛颗粒甲醛饱和

8、液偏酸，影响细胞核的染色，特别是放置较久后，易析出沉积在组织切片中，呈细小的黑褐色或黑色颗粒物