实验八 石蜡切片法.ppt

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1、实验八石蜡切片法一、实验目的学习石蜡切片法了解组织染色原理二、实验原理用石蜡渗透固化组织;用碱性染料如苏木精、碱性品红等,使细胞核着色;用酸性染料如伊红、酸性品红等,使细胞中的嗜酸性成分着色,如蛋白质。三、实验用品1、器材:切片机、水浴锅、染色缸、玻片、显微镜、试剂瓶、剪刀、镊子、烘箱、离心管或青霉素瓶子。2、试剂苏木色精、伊红、二甲苯、中性树胶、酒精、石蜡、氨水、盐酸、蛋清、甘油。3、材料各类你感兴趣的固定标本。四、实验步骤1、取材2、固定3、漂洗4、脱水5、透明6、透蜡7、包埋8、修块9、切片10、染色取材到切片取材——固定(Cannoy’s

2、),材料厚度2mm。100%酒精——100%酒精——二甲苯:酒精(1:1)——二甲苯——二甲苯——二甲苯:石蜡(65℃1:1)——石蜡(65℃)——石蜡(65℃),以上处理各10-30min,视材料大小而定,最后一步石蜡20min。包埋——修块——切片——贴片脱蜡与复水二甲苯——二甲苯——二甲苯/无水乙醇(1/1)——无水乙醇——无水乙醇——95%乙醇——80%乙醇——70%乙醇——50%乙醇——蒸馏水。以上处理各2-3min。染色与观察1%苏木色精(5min)——水洗——0.5%盐酸分色(数秒)——水洗——0.4%氨水蓝化——水洗(5min)—

3、—70%酒精——80%酒精——1%伊红(95%酒精溶解)——95%酒精——95%酒精——100%酒精——100%酒精——酒精/二甲苯——二甲苯——二甲苯——中性树胶封片。未注明时间的一律处理2-3min。五、作业简述石蜡切片过程,绘制你所观察到的细胞形态。提交一张你认为制作较好的玻片。

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