恶臭假单胞菌引起的欧洲鳗鲡烂鳃病

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1、第25卷第2期水产学报Vol.25,No.22001年4月JOURNALOFFISHERIESOFCHINAApr.,2001文章编号:1000-0615(2001)02-0147-04恶臭假单胞菌引起的欧洲鳗鲡烂鳃病樊海平(福建省淡水水产研究所,福建福州350002)摘要:从患烂鳃病的病鳗分离到多株细菌,其中三株经人工感染证实为病原菌,经生理、生化等测试鉴定为恶臭假单胞菌。其主要特征为革兰氏阴性、具动力的短杆菌;氧化酶、过氧化氢酶、枸掾酸盐利用、精氨酸双水解酶阳性;硝酸盐还原,鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶、明胶酶、尿素酶、V-P反应、吲哚反应阴性。对氟哌酸、妥布霉素、卡那霉素、庆大霉素敏感。

2、关键词:欧洲鳗鲡;烂鳃病;恶臭假单胞菌+中图分类号:S941.424文献标识码:AStudyonthegil-lrotdiseaseofAnguillaanguillainfectedbyPseudomonasputidaFANHa-iping(TheFreshwaterFisheriesResearchInstituteofFujianProvince,Fuzhou350002,China)Abstract:Thebacteriumstrainswereisolatedfromthegil-lrotdiseaseoftheEuropeaneel(Anguillaanguilla).Thei

3、solatewasproventobethepathogenofthedisease.BychallengetestandidentifiedtobethePseudomonasputida.ThebacteriaareGramnegativemotiveshortrods.ThePhysiologicalandbiochemicalcharacteristicswerefollowing:Oxidase,catalase,utilizationofsodiumcitrate,Argininedeydrolasepositive,nitriatesreducedtonitrites,orni

4、thinedecarboxylase,lysinedecarboxylase,gelatinase,Urease,vogesproskauerreactionnegative.ThebacteriumishightlysensitivetoNorfloxacin,Tobramycin,KanamycinandGentamycin.Keywords:Anguilllaanguilla;gil-lrotdisease;Pseudomonasputida欧洲鳗鲡养殖过程中,细菌性疾病危害严重,其中烂鳃病周年发生且发病率高。欧洲鳗烂鳃病常与寄生虫病、真菌病并发,因而给治疗带来了困难。鳗鲡烂鳃病病原主

5、要有柱状屈桡杆菌、噬纤维菌[1-3]等。本文报告了由恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida)引起的欧洲鳗鲡烂鳃病。1材料与方法1.1病原菌分离取检查鳃无寄生虫、真菌感染,鳃丝溃烂的濒死病鳗,用无菌生理盐水冲洗体表三遍,解剖取出鳃,经无菌生理盐水充分冲洗后,捣烂鳃丝,接种环取样于普通平板培养基划线,30e培养24h后,挑取形态收稿日期:2000-09-25基金项目:农业部/九五0渔业重点科研资助项目(95-A-96-03-02)第一作者:樊海平(1967-),男,江苏武进人,高级工程师,主要从事水产养殖动物疾病的防治技术研究。Tel:0591-3732007,E-mail:fanha

6、iping@163.net148水产学报25卷一致的优势菌落,进一步划线纯化,获纯培养后,移入斜面培养基,石蜡保存。1.2人工感染试验取体重为15g左右的健康鳗,于水族箱暂养5d,稳定后供人工感染用。暂养期间不投饵,连续充气,日换水50%,水温保持27e。90L水族箱放自来水50L,曝气24h后,移入试验鳗,每箱6尾一组,不换水,连续充气,试验期间水温恒定27e。取30e培养24h的斜面培养物,用肉汤培养基洗下,并用肉12-1汤培养基稀释制成10cfu#mL的菌悬液,根据设计浓度加入水族箱进行感染试验。同期进行创伤感染和浸浴感染,创伤感染用无菌解剖剪下一小片鳃丝。对照组不加菌液。每日记录死亡

7、结果。对MSO329-1菌株感染出现症状的病鳗分离细菌并进行重复感染,分离细菌。1.3病原菌的分类鉴定按照文献[4]、[5]介绍方法进行病原鉴定。对培养16h幼菌经2%磷钨酸磷酸缓冲液负染,透射电子显微镜观察。对照文献[6]、[7]鉴定至种。1.4药物敏感试验所用24种药敏纸片由上海伊华临床科技公司制造。涂布法接种,药敏纸片贴于培养基,每皿6片,[8]每种药物2片,30e培养24h后测定抑菌圈直径,按NCCL