青霉菌灭活菌丝体对烟草花叶病毒抑制作用的初步探究

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1、分类号密级公开编号弟擘碛士研究被嗲佐侉式题目：青霉菌灭活菌丝体对烟草花叶病毒抑制作用的初步探究学院（所、中心）生命科学学院专业名称植物学研究生姓名时红敏学号导师姓名陈穗云职称、教授年月论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，不存在剽窃或抄袭行为。与作者一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。现就论文的使用对云南大学授权如下：学校有权保留本论文（含电子版），也

2、可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文；学校有权公布论文的全部或部分内容，可以将论文用于查阅或借阅服务；学校有权向有关机构送交学位论文用于学术规范审查、社会监督或评奖；学校有权将学位论文的全部或部分内容录入有关数据库用于检索服务。内部或保密的论文在解密后应遵循此规定）研宄生签名：体导师签名：日期：摘要烟草花叶病毒，寄主范围广泛、易于传播，对农业生产造成了不小的损失。目前对仍没有理想的防治方法，以预防为主的综合防治仍是病害防治的主要措施。因此，探索有效的防治方法是当前防治研究的重点，具有重要的意义

3、。青霉菌灭活菌丝体是青霉素生产后的残余副产物，是近年来云南烟草种植上广泛应用的一种有机诱导抗病剂。本实验以心叶烟和本氏烟为实验材料，利用提纯的原液以及农杆菌介导的侵染性克隆（来初步探讨对的防治作用及作用机制。本文主要研宄结果如下：用分别对心叶烟进行系统诱导、局部诱导，同时开展对病毒的钝化实验，通过统计心叶烟上的枯斑，计算各类实验的结果，表明可诱导未感病的心叶烟产生抗性，提高对的抵抗作用，具有较好的预防效果；但对已感病的植株治疗效果不显著；局部诱导效果较好，但对病毒的直接钝化作用不明显。以农杆菌介导

4、的侵染性克隆为实验材料，利用实时焚光定量及荧光观察研宄了携带基因的侵染性克隆在烟草植株中的侵染路径，以基因表达检测的方法可以检测荧光尚未积累到可见条件下病毒的存在，结果表明在侵染性克隆从接种开始到进入维管组织开始系统侵染的速度是非常快的，小时就可以到达根部，小时就可以进入到顶部的心叶，完成了实际上的全株系统侵染。先喷施，小时后接种携带她基因的侵染性克隆，荧光观察发现，接种后的第天，组的叶出现绿色荧光，组的叶未出现绿色荧光，两组的其他叶片均未出现绿色荧光；第天，组叶的荧光面积增加，组叶出现零星的绿色

5、荧光，两组其他叶片无新变化；第天之后，组侵染与组相比，并没有明显的抑制作用。关键词：青霉菌灭活菌丝体；心叶烟；侵染性克隆；烟草花叶病毒；本氏烟；云南大学硕士学位论文病毒移动AbstractTobaccomosaicvirus(Tobaccomosaicvirus,TMV)isoneoftheseriousvirusdiseaseswhichwaswidelyspreadintheworldandcanthreatenthetobaccoproductionyield.Unfortunately,t

6、hereisnotefficientmethodtocontrolthisvirus.Untilnow，，，，，，，云南大学硕士学位论文，，，目录腺】第一章绪论烟草花叶病毒烟草花叶病毒的发现烟草花叶病毒危害烟草花叶病毒研究进展烟草花叶病毒病害特征烟草花叶病毒病毒粒体形态及其基本特征烟草花叶病毒基因组及其产物烟草花叶病毒株系划分烟草花叶病毒的传播方式和寄主范围烟草花叶病毒的移动途径烟草花叶病毒的防治技术研宄进展抗病诱导相关物质研究进展植物诱导抗病性生物源抗病诱导物寡糖类蛋白类微生物抗病诱导物非生物源

7、抗病诱导物抗病毒物质作用机理抑制病毒的侵染抑制病毒的增殖降低病毒的移动速率诱导植株产生抗性诱导植物产生相关病程相关蛋白青霉菌灭活菌丝体诱导作物抗病云南大学硕士学位论文青霉菌灭活菌丝体及其应用本研究实验材料选取的依据、目的和意义实验材料心叶烟本氏烟侵染性克隆研究目的研究意义第二章青霉菌灭活菌丝体诱导心叶烟抵制烟草花叶病毒作用的初步探究材料与方法材料供试烟草及病毒主要试剂和仪器方法烟草花叶病毒的提纯提纯病毒纯度和浓度的检测对心叶烟的诱导抗性对烟草花叶病毒的抑制作用结果与分析的提纯与检测对心叶烟的系统诱

8、导抗性预防实验治疗实验对心叶烟的局部诱导抗性对的钝化作用讨论第三章青霉菌灭活菌丝体诱导本氏烟对烟草花叶病毒的抑制作用的初步探讨材料与方法3.1.1材料供试材料主要试剂和仪器方法质粒测序和引物设计烟草花叶病毒农杆菌侵染性克隆侵染液的制备烟草花叶病毒在本氏烟中的移动方向模式探究对本氏烟中烟草花叶病毒的抑制结果与分析质粒提取总提取及检测接种植株绿色荧光的移动实时荧光定量检测侵染性克隆在本氏烟中的移动方向构建侵染性克隆模拟病毒在烟草中移动的模式图利用荧光观察研宄对侵染性克隆增殖和移动的抑制