自发性高血压和正常血压大鼠脑动脉缝隙连接的表达和功能差异

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1、分类号：密级：学号：2012109003单位代码：10759石河子大学硕士学位论文自发性高血压和正常血压大鼠脑动脉缝隙连接的表达和功能差异学位申请人潘立君指导教师马克涛申请学位门类级别理学硕士学科、专业名称生理学研究方向神经生理与血管生理所在学院医学院中国·新疆·石河子2015年5月ThedifferencesgapjunctionintheexpressionandfunctionofcerebralarteryinspontaneouslyhypertensiveandnormotensiveratADissertationSubmittedtoShihez

2、iUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofNaturalScienceByPanLiJun(Physiology)DissertationSupervisor:Prof.MaKeTaoMay,2015摘要目的：观察自发性高血压大鼠（spontaneouslyhypertensiverat,SHR）和正常血压Wistar大鼠脑动脉细胞间缝隙连接通道功能和连接蛋白（connexin,Cx）表达的变化，进而探讨脑动脉中缝隙连接的功能和表达与高血压发病的相关性。方法：应用全

3、细胞膜片钳观察SHR和正常血压Wistar大鼠脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接通讯功能的变化；应用RT-PCR和Wersternblot技术比较SHR和正常血压Wistar大鼠脑动脉中Cx37、Cx40、Cx43和Cx45的mRNA和蛋白表达差异；采用透射电镜技术比较SHR和正常血压Wistar大鼠脑动脉缝隙连接的形态学改变。结果：（1）全细胞膜片钳技术结果显示SHR脑动脉平滑肌细胞膜电容和膜电导都显著高于正常血压Wistar大鼠（P<0.05），提示SHR脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接通讯能力增强。（2）RT-PCR检测SHR和正常血压Wistar大鼠脑动脉Cx37、C

4、x40、Cx43和Cx45mRNA的表达。与正常血压大鼠相比，SHR脑动脉Cx37和Cx40mRNA的表达显著下调（P<0.01)；Cx43mRNA的表达与正常血压大鼠相比，无显著差异（P>0.05）；此外，SHR脑动脉Cx45mRNA的表达较正常血压大鼠显著升高（P<0.01）。（3）Westernblot检测SHR和正常血压Wistar大鼠脑动脉中Cx蛋白表达，结果显示出与转录水平相一致的结果，即：与正常血压大鼠相比，SHR脑动脉Cx37和Cx40蛋白的表达明显降低（P<0.05）；SHR脑动脉Cx43蛋白表达无统计学差异（P>0.05），但Cx43的磷酸化

5、水平显著高于正常血压大鼠（P<0.01）；SHR脑动脉Cx45的表达水平显著高于正常血压大鼠（P<0.01）。（4）透射电镜检测SHR和正常血压Wistar大鼠脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接的数量发现，与正常血压大鼠比较，SHR脑动脉平滑肌细胞间缝隙连接的数量显著升高。结论：SHR脑动脉平滑肌细胞间的缝隙连接通讯能力增强。缝隙连接可能通过下调血管内皮Cx37和Cx40的表达并上调平滑肌细胞Cx45的表达来调节脑动脉舒缩活性，进而影响高血压的发生发展。关键词：自发性高血压大鼠；高血压；脑动脉；缝隙连接；连接蛋白论文类型：A（基础研究）IAbstractObjectiv

6、e:Toinvestigatethechangeofconnexins(Cxs)inbrainartery(BA)ofspontaneouslyhypertensiverats(SHR)andnormotensiveWistarrats.Methods:wholecellpatchclampinvestigatetheelectrophysiologicalpropertiesofgapjunctioninBAbetweentheSHRandWistarrats.RT-PCRandWesternblotwereusedtoinvestigatethediffer

7、enceexpressofgapjunctioninBAbetweentheSHRandWistarrats.ApplicationoftransmissionelectronmicroscopytoobservationthemorphologicalchangeofgapjunctionbetweensmoothmusclecellsinBA.Results:(1)Wholecellpatchclamptechniquefoundthemembranecapacitanceandconductivitytoarterysmoothmusclecellinbr

8、ainofSHRwere