猪论文：wnt-β-catenin信号通路调控猪骨骼肌纤维类型变化初步探究

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1、猪论文：Wnt/B-catenin信号通路调控猪骨骼肌纤维类型变化的初步研究【中文摘要】骨骼肌纤维类型及数量影响家畜肉品质。根据其代谢和收缩功能，猪生后骨骼肌纤维分为慢速氧化型、快速氧化型、快速酵解型和中间型四种，分别由不同的肌球蛋白重链(myosinheavychain,MyHC)异构体MyHCT、MyHC-II2a、MyHC-II2b和MyHC-II2x确定。猪骨骼肌纤维数目在出生前已确定，在生后的生长发育过程中，主要是骨骼肌卫星细胞的分化及肌纤维类型的转变。研究如何有效控制猪骨骼肌卫星细胞定向分化，调控肌纤维类型组成,改善肉品质具有重要的实践意义。Wnt/3-ca

2、tenin信号通路在肌肉生长、发育过程中起着重要调节作用。目前,Writ/B-catenin信号通路调控出生后猪骨骼肌纤维类型组成作用还未见报道。因此,本研究利用冰冻切片IIE染色、油红0染色＞mATPase及免疫组化等组织学方法及RealtimePCR、WesternBlotting分子生物学技术，在明确猪骨骼肌发育的组织形态学特征和组织学规律的基础上，研究Wnt/B-catenin信号通路相关基因在猪骨骼肌发育过程中的表达规律;再利用15mMol/LLiCl处理单根肌纤维分离培养的骨骼肌卫星细胞，采用WesternBlotting.免疫荧光等细胞生物学及分子生物学技

3、术，探讨其在猪骨骼肌卫星细胞分化过程中的调控作用。主耍研究结果如下：1•随着猪H龄增长，骨骼肌纤维横切面积逐渐增大，慢肌向快肌转化，慢肌纤维横切面积明显小于快肌纤维横切面积；比目鱼肌相对于背最长肌和趾长伸肌，其聚脂能力强,慢肌含量高。2.猪背最长肌发育过程MyHC-I.GSK-3B、B-catenin和Fz3mRNA随着个体口龄增长表达量下降;MyHC-IIbmRNA表达逐渐升高;MyHC-IIamRNA表达在1日龄~2周龄阶段升高后又降低:MyIIC-IIxmRNA表达变化不显著。慢肌、B-catenin和p-GSK-3B蛋白与mRNA表达一致，而p-0-cateni

4、n>GSK-3B蛋白及快肌蛋白表达上调。B-catenin和慢肌蛋白表达量在6月龄猪比目鱼肌中表达最高，趾长伸肌中表达最低;快肌蛋白的表达量则相反;3.15mMol/LLiCl诱导骨骼肌卫星细胞向慢肌分化,p-GSK-30、B-catenin、myosin及慢肌蛋白增加,p-B-catenin、GSK-3P及快肌蛋白减少，并且核内源性P-catenin增多。综上所述,随着年龄增长，骨骼肌纤维横切面积逐渐增大,且快肌纤维显著大于慢肌；比目鱼肌相对于背最长肌和趾长伸肌，其聚脂能力强，慢肌含量高。发现Wnt/B-catenin信号通路促进猪骨骼肌慢肌纤维生长。利用LiCl激活

5、经典Wnt信号通路，在猪骨骼肌卫星细胞分化中发挥正调节作用，促进成肌分化;并诱导猪骨骼肌卫星细胞向慢肌分化。【英文摘要】Thenumberofskeletalmusclefiberandtypeshaveinfluenceonthemeatqualityoflivestock・Thereweredividedintoslowoxidative,fastoxidative,fastglycolyticandintermediatetypeaccordingtothemetabolismandcontract!lefunctionofpostnatalporeine,res

6、pectively,bydifferentmyosinheavychain(MyHC)isormersofMyHC~I,MyHC-IIa,MyHC-IIbandMyHC-IIxdetermined.Thenumberofskeletalmusclefiberweredeterminedporcineprenatal,itbewilldependonskeletalmusclesatellitecellsdifferentiationandmusclefibertypetransformationinthefuturedevelopment・Studyhowtoeffec

7、tivelycontrolthesatellitecellsdirectionaJdifferentiationandregulateoffibertypecompositiontoimprovethemeatqualityhasimportantpracticalsignificance・Wnt/3-cateninsignalingpathwaywhichplaysanimportantroletoregulatemusclegrowthanddevelopment・Currently,ithasnotbeenreportedthatt