文蛤病原菌需钠弧菌的分离鉴定与免疫防治技术研究

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1、山东农业大学硕士学位论文中文摘要弧菌(vibrio)是海洋环境中最常见的细菌类群之一，广泛分布于近岸、河口海区的海水和生物体中，其致病性受宿主的生理状态及水质环境条件等综合因素的影响较大，是海水养殖动物的主要病原菌之一。危害的对象包括鱼类、甲壳类和贝类动物，给我国的海水养殖事业带来了很大的损失。预防与控制海水养殖动物弧菌病的发生，加强弧菌病的研究，对海水养殖业可持续发展具有重要的意义。文蛤(geretrixmere胁Linnaeus)是我国沿海常见的一种重要经济贝类，是出口创汇的重要水产品之一。近年来，随着养殖规模的扩大，由于养殖水域水质环境恶化和各种疾病的流行而引发的养殖文蛤的

2、大规模死亡已造成巨大的经济损失，因此，预防与控制养殖文蛤病害的发生，加强文蛤疾病的研究，已经成为保障文蛤养殖业健康发展的当务之急。本实验从患病文蛤体内分离出一优势菌株WTOI，回归感染试验证明是文蛤的致病菌，对该菌形态、生理生化特征、盐度、温度和pH值生长条件以及16SrRNA基因序列进行了研究。结果表明，该菌为革兰氏阴性菌，发酵葡萄糖产酸不产气，氧化酶阳性，生长需NaCl，无色素，不发光，在TCBS平板上形成圆形黄色菌落，对弧菌抑SU齐Uo／129敏感，具有弧菌属的典型特征。16SrRNA基因序列分析表明，该菌与需钠弧菌(Fibrionatriegen)的亲缘关系最为接近，其同

3、源性达99％以上，因此将该菌鉴定为需钠弧菌，病原菌对文蛤的半数致死量为5．5×10℃FU／mL，在温度10℃-42℃、PH值5一11、盐度5％o-80％o的环境条件下都能生长。药敏试验结果表明，该菌对氟哌酸、复方新诺明、菌必治、先锋必、链霉素、氯霉素、庆大霉素等抗生素较为敏感。微生态制剂(microec0109ics)具有防治疾病、促进生长、增加体重等多种功能，且无污染、无残留、不产生抗药性。不仅可以改善养殖水域环境，还可以提高养殖对象的机体免疫力，减少病害的发生，因此具有广泛的应用前景。本研究在实验生态条件下，观察浓度分别为l×105efu／L、l×106cfu／L和l×107

4、cfu／L的微生态制剂(主要成分为芽孢杆菌)对文蛤暴露后第1d、3d、7d、21d、28d和恢复14d后对文蛤消化腺中的抗菌活力、山东农业大学硕士学位论文AbstractVibfioisoneoftheprimarypathogenicbacteriumsofoceanrearedcreature，whichdistributesoverseawaterandorganismnearbythecoast，anditspathogenicitydePendsonparasitifer’physiologicalfunctionsandwaterqualityenvironmenta

5、lcondition,ete．Rhazardousfishes，．Shrimpandanyanothershellfishes，andseriousiycontaminatesaquacultureinchina．Accordingly,inordertoencouragemariculture’Scontinuedevelopment，VibriosismBstbeprophylaxisedandcontrolled．HardclamMeretrixmeretrixis+aimportantcommerciallymolluscspeciesalongthecoastinChi

6、na．Recently，ascultivationformula'sexpansion,Meretrixmeretrix’Slargescaledeceasehaveposedgreateconomyexpensesbecauseofbadwaterqualityandepidemic．Thereby,wemustprecludeandcontroldiseasewhichhappensonhardclamMeretrixmeretrixtoensureitscultivationdevelophealthly．Vibriosis’epidemicityinfectionisma

7、inlymasonofitsdeath，somepathogenicbacteriumhavebeenisolatedandproveditspathogenicityfromdiseasedhardclamMeretrixmeretrix,such勰Vibrioalginolyticus,VibriofumissiiandVibrioparahaemolyticus,andsomescholarshavestudiedonpathogenicityandthepreventio