灵香草中总黄酮的提取工艺研究

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1、灵香草中总黄酮的提取工艺研究作者：杨瑞云，李远，梁凤琴，兰艳素，楚利敏，管海波，银小玲【摘要】目的研究灵香草中总黄酮的最佳提取工艺。方法采用正交实验，考察了溶剂浓度、液料比、提取时间、提取次数对灵香草中总黄酮提取量的影响。结果灵香草中总黄酮最佳提取工艺为60%乙醇，液料比10∶1，提取3次，2h/次。结论该工艺简单易行，是灵香草中提取总黄酮的有效途径。【关键词】灵香草;总黄酮;提取工艺;正交实验　　Abstract：ObjectiveTostudyandoptimizetheextractiontechniqueofthetot

2、alflavonoidsinLysimachiafoenum-graecumHance.MethodsOrthogonaltestwascarriedouttoinvestigatetheeffectsofconcentrationofsolvent,theradioliquidtomaterial,timeofextraction,andfrequencyofextractiononextractionresultsoftotalflavonoidsfromLysimachiafoenum-graecumHance.Resul

3、tsTheoptimumextractiontechniquewastoextractLysimachiafoenum-graecumHancein60%ethanolwiththeratioofliquidtomaterialat10∶13times,with2hoursforeachtime.ConclusionTheoptimaltechniqueissimpleand8feasible,andcanprovidereferenceforfurtherresearchofLysimachiafoenum-graecumHa

4、nce.　　Keywords：Lysimachiafoenum-graecumHance;Totalflavonoids;Orthogonaltest;Extractiontechniques　　灵香草Lysimachiafoenum-graecumHance为报春花科排草属植物[1]，主产于广西、广东、云南等地，有“香中之王”的称号，是一种重要的天然香料来源。同时，灵香草全草入药，味甘，性平，归肺、胃经，具有解表、止痛、行气、驱蛔的功效[2]，极具药用研究价值。本课题组在对灵香草化学成分的研究中，发现其中富含黄酮类成分。黄酮类

5、化合物在自然界分布广泛，具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌消炎、抗衰老等功效。然而迄今针对灵香草中总黄酮提取工艺的研究尚未见报道。本文通过正交实验优选灵香草中总黄酮的最佳提取工艺条件，为开发和利用灵香草中的黄酮类成分提供理论参考。　　1材料与仪器　　1.1材料灵香草2007-07采于广西金秀县，自然风干后，在真空干燥箱中以60℃干燥至恒重，粉碎备用;芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);所用试剂均为分析纯。8　　1.2仪器TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司);BS124S型电子天平[赛多利斯(北京)科学有限公

6、司)];R-1001型旋转蒸发仪(郑州长城科工贸有限公司);DZF-1B型真空干燥箱(上海跃进医疗器械厂)。　　2方法与结果[3]　　2.1总黄酮含量的测定　　2.1.1芦丁标准溶液的配制精密称取已干燥至恒重的芦丁标准品5mg，用80%甲醇定容至50mk容量瓶中，摇匀即配得0.10mg/ml芦丁标准液。　　2.1.2测定波长的选择精密量取2.0ml芦丁工作液于10ml容量瓶中，加80%甲醇溶液至5ml，加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6min后，加10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，放置6min，加10%氢氧化钠溶液1.

7、5ml，再加80%甲醇定容，放置15min。以试剂空白做参比，在260～600nm波长范围内进行紫外光谱扫描，确定505nm为最大吸收波长。　　2.1.3标准曲线的制作和回归方程的建立分别精密量取对照品溶液0.0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml置于108ml容量瓶中，各加80%甲醇溶液至5ml，再加0.3ml5%亚硝酸钠溶液，摇匀，放置6min后，加10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，放置6min，加10%氢氧化钠溶液1.5ml，用80%甲醇溶液定容至10ml，摇匀，放置15min后，以空白液作参照，在505n

8、m波长处测定吸光度。以芦丁浓度(X)和吸光度(Y)绘制标准工作曲线(见图1)，并作最小二法线性回归，得线性回归方程：Y=5.8038X+0.0507，相关系数为R2=0.9994。　　2.1.4样品液的制备和黄酮含量的测定精密称取20g已干燥至恒重的灵香草样品，