葛根黄酮对亚急性衰老模型小鼠抗氧化作用的研究

《葛根黄酮对亚急性衰老模型小鼠抗氧化作用的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、葛根黄酮对亚急性衰老模型小鼠抗氧化作用的研究作者：郑王巧郭春花张晓一宋丽华来丽娜李海菊【摘要】目的：考察葛根黄酮对衰老模型小鼠抗氧化能力的影响。方法：用D半乳糖制备衰老模型小鼠，分为正常对照组、模型组、阳性对照组、高、低剂量组，检测各组小鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)水平变化。结果：葛根黄酮能显著降低衰老小鼠血清MDA水平，同时可提高SOD和GSH—PX活力水平。结论：葛根黄酮对亚急性衰老模型小鼠具有抗氧化作用。【关键词】葛根黄酮;抗氧化;

2、亚急性衰老模型D半乳糖致小鼠亚急性衰老模型因其衰老变化明显，模型稳定，在抗衰老研究中被广泛应用。一般认为，D半乳糖引起的代谢紊乱使机体过氧化反应增强是其致老化反应的重要因素。葛根黄酮(Puerarin7flavonoid)系葛根中的主要成份之一，葛根始载于《神农本草经》,为豆科植物野葛和粉葛的干燥根，具有解肌退热、生津透疹、升阳止泻的功效。葛根主要有效成分为葛根黄酮和大豆苷元。葛根黄酮药理作用研究较多，临床应用非常广泛，对心脑血管疾病、视网膜疾病等具有良好疗效。体外研究表明[1-4]，葛根黄

3、酮具有较强的抗氧化能力，能明显清除·OH、DPPH·自由基，可用于防止生物膜的氧化损伤。本研究采用D半乳糖致小鼠亚急性衰老模型，以观察葛根黄酮对衰老模型小鼠抗氧化能力的影响。　　1材料与方法　　1.1葛根黄酮的提取[5]取葛根药材粉碎成粗粉，置圆底烧瓶中，加95%乙醇回流1h，抽滤，保留滤液，药渣加95%乙醇回流1h，抽滤，滤液合并，回收乙醇并浓缩成膏状，真空干燥得粗提物，将粗提物加入蒸馏水后加热煮沸，冷却到室温过滤，再将滤液中加入NaC1后搅拌溶解，静置2d析出白色沉淀，过滤出沉淀并用少量水

4、洗涤，得葛根黄酮纯品。　　1.2试剂与仪器阳性对照药维生素E胶丸(浙江医药股份有限公司新昌制药厂，批号20090206);D(+)半乳糖(上海君创生物科技有限公司);SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所，批号20090102);MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所，批号20081205);GSH—PX试剂盒(南京建成生物工程研究所，批号20090209);TDL5000低温冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);TU1901紫外可见分光光度计(北京普析通用);电热恒温水浴锅(常州国华电器有限公司);

5、万分之一电子天平(赛多利斯丹佛公司)。超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、GSH—PX含量测定均按试剂盒说明书测定。7　　1.3动物分组与处理健康昆明小鼠75只(实验动物中心提供)，体重(18±2)g，雌雄各半，喂养普通饲料适应1W后，空腹称重，眼底静脉采血测血清MDA后随机分为5组，每组15只，雌雄各半。组间体重、血清MDA水平无明显差异。5组分别为正常组(腹腔注射(ip)生理盐水+灌胃(ig)蒸馏水)，衰老模型组(ipD(+)半乳糖200mg·kg-1+ig蒸馏水)，低剂量组(i

6、pD(+)半乳糖200mg·kg-1+ig葛根黄酮50mg·kg-1)，高剂量组(ipD(+)半乳糖200mg·kg-1+ig葛根黄酮150mg·kg-1)，阳性对照组(ipD(+)半乳糖200mg·kg-1+ig维生素E100mg·kg-1)。　　1.4标本采集本实验用昆明小鼠ipD(+)半乳糖造成衰老模型，ipD(+)半乳糖5W后，模型组小鼠血清MDA高于正常对照组，但无统计学意义;当时间增至7W后，血清MDA明显高于正常，两组数据比较有显著意义，故实验时间定为7W。7W后取材，所有小鼠于取

7、材前1d停饲料，并禁食12h，乙醚麻醉，眼底静脉取血，离心取血清备用。　　1.5统计方法采用SPSS13.0软件处理，实验数据以x±s表示，多组间比较用方差分析，两均数比较用t检验，显著性界值P=0.05。　　2结果7　　2.1葛根黄酮对衰老模型小鼠血清脂质过氧化物MDA含量的影响　　结果见表1。MDA可反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映细胞受损的程度。血清MDA测定数据显示：模型组血清脂质过氧化物MDA含量比正常饲料组有明显增高(P<0.001)，阳性对照组及高剂量组均能明显降低血清M

8、DA水平，与模型组比较均有显著性意义(P<0.01);低剂量组血清MDA与模型组比较有所降低，但无统计学意义(P>0.05)。　　2.2葛根黄酮对衰老模型小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响　　结果见表1。SOD对机体的氧化和抗氧化平衡起着至关重要的作用。血清SOD测定数据显示，模型组血清SOD含量与正常饲料组相比有显著性差异(P<0.001)，阳性对照组及高剂量组均能明显升高血清SOD活力水平，与模型组比较均有显著统计学意义(P<0.05)，低剂量组血清SOD与模