钩藤散浸膏对亚急性衰老模型小鼠的影响

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1、钩藤散浸膏对亚急性衰老模型小鼠的影响黄厚才1，胡元亮2，胡春萍1，彭蕴茹1，丁永芳【摘要】目的观察钩藤散浸膏对衰老模型小鼠智力、乙酰胆碱酯酶（ACHE）、抗氧化酶（SOD）、自由基（MDA）的影响，探讨其抗衰老作用及机制。方法小鼠随机均分为6组，除正常对照组外，各组每天皮下注射D-半乳糖（0.05g/kg），连续注射6周。从注射的第7天开始，3个实验组同时灌胃高、中、低剂量的钩藤散浸膏，阳性对照组灌以维生素E（0.05g/kg）模型对照组与正常对照组每天灌胃等量的蒸馏水，连续给药5周后测定小鼠的训练成绩、记忆成绩及血清

2、SOD、ACHE和脑组织MDA的含量变化。结果实验组的训练成绩显著（P＜0.05），测试成绩极显著（P＜0.01）好于、血清SOD、ACHE活力极显著（P＜0.01）高于、脑MDA含量极显著（P＜0.01）低于模型对照组；与正常组比，除ACHE偏高外，其余各指标相近。结论钩藤散能提高抗氧化能力，降低自由基含量，增强胆碱能神经系统功能，从而防止衰老。【关键词】D-半乳糖；钩藤散；衰老；小鼠【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectsofGoutengsanextractonmemory，m

3、alondiadehyde（MDA），superoxidedismutase（SOD），ACHEinmicetostudytherapeuticeffectsandmechanismofGoutengsanonagingmodel.MethodsMicelydividedinto6groups.Allgroups，excepttheeserumSOD，ACHEactivitiesinGoutengsanextract-treatedmiceiceentofcholinergicnervesystem.【Keyice老年

4、痴呆是威胁人类健康的重大疾病之一，对其的防治一直是全球关注的焦点。钩藤散源于《本事方》，由钩藤、石膏、陈皮、麦冬、半夏、茯苓、人参、防风、生姜、甘草、菊花等11味药组成，原为治疗肝厥头晕之证的经典方剂。本次实验进行了钩藤散浸膏的抗衰老实验，以观察钩藤散浸膏在抗衰老方面的影响及机制。1材料1.1药品与试剂（1）钩藤散：由本院中药制剂室按传统方法水提、浓缩、消毒等制成浸膏。临用前每19ml钩藤散浸膏加蒸馏水配至100ml，变成0.5g生药/ml清膏溶液，实验中所用剂量均以生药量计。（2）维生素E胶丸：厦门鱼肝油厂（批号：1

5、0842002）。用前将维生素E胶丸用蒸馏水按10粒/100ml蒸馏水配成溶液。（3）D-半乳糖：国药集团化学试剂有限公司（批号：20050121）。（4）乙酰胆碱酯酶（ACHE）活性测定试剂盒：南京建成生物工程研究所（批号：20050225）。（5）超氧化物歧化酶（SOD）活性测定试剂盒：南京建成生物工程研究所（批号：20041221）。（6）丙二醛MDA活性测定试剂盒：南京建成生物工程研究所（批号：20041224）。1.2动物清洁级KM小鼠：18-22g，雌雄各半，由中科院上海实验动物中心提供，许可证号：SCXK

6、（沪）2002-0010。1.3仪器（1）MG-2迷宫：张家港市生物医学仪器厂生产。（2）高速冷冻离心机：贝克曼产品。（3）721分光光度计：上海第三分析仪器厂产品。（4）高速分散器XHF-1：上海金达生化仪器厂产品。1.4实验环境清洁级，合格证号：SYXK（苏）2002-0007。2方法2.1分组、造模、给药将小鼠分为6组，每组12只，雌雄各半，先进行造模，正常对照组皮下注射等体积生理盐水（1ml/kg），其余各组每天皮下注射D-半乳糖，0.05g/kg体重，连续注射6周。注射7天后开始给药，实验高剂量组每天灌胃给1

7、0g生药/kg体重，中剂量组5g/kg，低剂量组2.5g/kg，阳性对照组每天给维生素E0.05g/kg体重，模型对照组与正常对照组每天给等量的蒸馏水，每天灌胃1次，每次0.2ml/10g体重；连续给药5周。2.2学习训练［1］最后1天给药后1h进行学习训练，训练时，将小鼠放入Ⅰ臂起步区停留3min后给予电击（35V），按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ或Ⅰ→Ⅲ→Ⅱ→Ⅰ连续试验：a项:小鼠到达安全区停留0.5min，然后取出放回原臂，1min后给予下次电击，达到连续2次直接逃至安全区后，以逃入的安全区作为起步区进行电击训练。当小鼠在三臂

8、均达到连续2次直接逃至安全区后，进行b项试验：小鼠在Ⅰ臂起步区停留1min后给予电击，逃至安全区停留0.5min，再以此区作为起步区予以电击，连续循环电击训练（每两次电击之间休息1min），以小鼠连续10次（或9/10）正确反应（直接逃入安全区）作为空间辨别记忆指标，每回连续学习的电击总次数一般不超过30次。最后将a项和b项相加作